[发明专利]一种缓解马铃薯连作障碍的微生物菌剂及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种缓解马铃薯连作障碍的微生物菌剂，其特征在于，包括以下菌株：芽孢杆菌，荧光假单胞菌，灰黄青霉，木霉菌，放线菌；所述菌剂中的群落总数为：芽孢杆菌2.0×10⁸-9.0×10⁹cfu/g、荧光假单胞菌5.0×10⁷-1.0×10⁹cfu/g、灰黄青霉1.0×10³-5.0×10⁴cfu/g、木霉菌1.0×10³-5.0×10⁴cfu/g、放线菌5.0×10⁸-8.0×10¹⁰cfu/g。

2.根据权利要求1所述的一种缓解马铃薯连作障碍的微生物菌剂，其特征在于，所述菌剂中的群落总数为：芽孢杆菌4.0×10⁸cfu/g、荧光假单胞菌5.0×10⁸、灰黄青霉3.0×10³cfu/g、木霉菌5.0×10³cfu/g、放线菌3.0×10¹⁰cfu/g。

3.根据权利要求1所述的一种缓解马铃薯连作障碍的微生物菌剂，其特征在于，所述芽孢杆菌包括各菌种重量百分比为：枯草芽孢杆菌40-60％、多粘类芽孢杆菌10-15％、胶冻样芽孢杆菌5-10％、巨大芽孢杆菌5-10％、地衣芽孢杆菌5-25％。

4.如权利1-3任一所述的一种缓解马铃薯连作障碍的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)芽孢杆菌、荧光假单胞菌或放线菌的发酵培养过程是：

将斜面保存的菌种接于装有100mL LB培养基的250mL摇瓶中，30-40℃、150-180r/min活化培养20-26h，然后将活化的菌液按体积比8-10％的接种量接入装有500mL LB培养基的1000mL摇瓶中，30-40℃、150-180r/min培养10-14h，得到种子液；将种子液按体积比8-10％的接种量接入种子罐的发酵培养基中，30-40℃、150-180r/min发酵培养20-26h，获得发酵种子液，然后将发酵种子液按体积比8-10％的接种量接入发酵罐的发酵培养基中，30-40℃、150-180发酵培养46-48h，得到芽孢杆菌、荧光假单胞菌或放线菌的发酵菌液，离心，得到菌体备用；

(2)灰黄青霉或木霉菌的发酵培养过程是：

将斜面保存的菌种接入装有100mL马铃薯培养基的摇瓶中，25-30℃、150-180r/min活化培养20-26h，然后将活化的种子液按体积比6-8％的接种量接入装有500mL马铃薯培养基的1000mL摇瓶中，25-30℃、150-180r/min振荡培养20-26h得到种子液；将种子液按体积比6-8％的接种量接入种子罐的发酵培养基中，25-30℃、150-180r/min发酵培养20-24h，得到发酵种子液，将发酵种子液按体积比6-8％的接种量接入发酵罐的发酵培养基中，25-30℃、150-180r/min发酵培养58-62h，得到灰黄青霉或木霉菌的发酵菌液，离心，得到菌体备用；

(3)将所述步骤(1)得到的菌体与所述步骤(2)得到的菌体按群落数为：芽孢杆菌2.0×10⁸-9.0×10⁹cfu/g、荧光假单胞菌5.0×10⁷-1.0×10⁹cfu/g、灰黄青霉1.0×10³-5.0×10⁴cfu/g、木霉菌1.0×10³-5.0×10⁴cfu/g、放线菌5.0×10⁸-8.0×10¹⁰cfu/g的比例混合，置于鼓风干燥箱或自然条件下干燥通风处，干燥，即得到该微生物菌剂。

5.根据权利要求4所述的一种缓解马铃薯连作障碍的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中种子罐和发酵罐中的发酵培养基为葡萄糖4-6g/L，蛋白胨9-12g/L，磷酸二氢钾9-12g/L，pH 6.8-7.2，121℃实罐灭菌20min。