[发明专利]一种L-核糖异构酶及其在生物法制备L-核糖中的应用

说明书

本发明公开了一种L‑核糖异构酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。该L‑核糖异构酶具有较好的热稳定性和pH稳定性，对L‑核酮糖的催化效率能达到85％以上。本发明还公开了包含上述L‑核糖异构酶的重组菌以及该重组菌的构建方法，该重组菌对L‑核酮糖的催化效率能达到81％以上。本发明描述的L‑核糖异构酶对于L‑核糖的工业化生产具有很好的应用前景与经济价值。

技术领域

本发明属于一种技术领域，具体涉及来自发酵放线纤维菌(Actinotaleafermentans NX-1)的L-核糖异构酶及其应用。

背景技术

L-核糖属于极其稀有的单糖，是一种重要的医药中间体，具有重要的医学价值，由L-核糖合成的各种L-核糖衍生物，广泛应用于抗病毒与抗肿瘤领域。

目前L-核糖的制备主要采用化学法，需要经历至少7步的复杂反应，而且面临副产物多，产率低下等问题。L-核糖异构酶(L-RI)能够以L-核酮糖为原料制备L-核糖，具备反应温和、产率高等特点，而L-核酮糖能够通过生物法从L-阿拉伯糖催化得到。目前文献仅报道了三种L-核糖异构酶，分别来源于Acinetobacter sp.DL-28，Geodermatophilus obscurusDSM43160和Cellulomonas parahominis MB426。然而已发现的L-RI对L-核酮糖的催化效率均不高，因此挖掘对L-核酮糖具有高催化能力的L-RI对于生产L-核糖有着极其重要的意义。

发明内容

本发明要解决的技术问题是，提供一种对L-核酮糖具有高催化能力的L-核糖异构酶。

本发明还要解决的技术问题是，提供一株包含上述L-核糖异构酶的基因工程菌及其构建方法。

本发明最后要解决的技术问题是，提供上述L-核糖异构酶和上述基因工程菌在制备L-核糖中的应用。

为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案：

一种L-核糖异构酶，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该L-核糖异构酶来自发酵放线纤维菌(Actinotalea fermentans NX-1)。所述L-核糖异构酶的氨基酸序列如下：

Met Thr Arg Thr Tyr Val Thr Arg Arg Glu Tyr Asp Glu Trp Leu Gln

Glu Ala Ala Ser Leu Ala Arg Ala Leu Arg Tyr Pro Ile Thr Pro Asp

Met Val Asn Asp Ser Ala Gly Ile Val Trp Gly Asp Asp Gln Tyr Ala

Ala Phe Glu Asn Gly Leu Trp Ser Arg Glu Pro Tyr Glu Leu Met Val

Ile Phe Glu Ala Leu Asn Glu Pro Ala Val Asp Gly Leu Pro Val Ser

Ala Ala His Gly Ser Glu Tyr Ser Gly Leu Cys Asp Asp Leu Met Ile

Val His Pro Gly Lys Phe Cys Pro Pro His Tyr His Asn Arg Lys Thr

Glu Ser Tyr Glu Val Val Leu Gly Glu Met Asp Val Phe Tyr Gly Pro

Glu Pro Val Arg Val Glu Asp Glu Glu Thr Val Thr Trp Ser Pro Met