[发明专利]一种组织工程化神经移植体及其制备方法

权利要求书

1.一种组织工程化神经移植体的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1）：丝蛋白微纳米纤维多孔支架的构建：蚕丝脱胶后，均匀分散于有机溶剂中，再经反复冻融，水洗后得到三维丝蛋白微纳米纤维多孔支架；

步骤2）：成纤维细胞的接种培养：提取成体成纤维细胞，并将其接种于含有步骤1)制备的丝蛋白微纳米纤维多孔支架的培养基上，进行培养扩增成纤维细胞；

步骤3）：成纤维细胞的诱导分化：在步骤2）培养基中添加小分子化合物组合CFLSSVY，经诱导后得到组织工程化神经移植物；

其中，小分子化合物组合CFLSSVY为：CHIR99021，Forskolin，LDN193189，SB431542，SP600125，VPA和Y27632的组合物。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤1）的蚕丝为桑蚕丝、柞蚕丝、蓖麻蚕丝、天蚕丝或木薯蚕丝中的任一一种或几种的混合物。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤1）的丝蛋白微纳米纤维多孔支架的纤维直径在十纳米到十微米之间。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤1）的丝蛋白微纳米纤维多孔支架中含有活性物质视黄酸。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤2）的成纤维细胞为皮肤成纤维细胞。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述各小分子化合物的浓度分别为：CHIR99021为3 μM，Forskolin为50 μM，LDN193189为0.1 μM，SB431542为2 μM，SP600125为10 μM，VPA为0.5 mM和Y27632为5 μM。

7.根据权利要求1-6所述任意一种制备方法制备的组织工程神经移植体。

8.根据权利要求7所述的组织工程神经移植体，其特征在于：所述神经移植体由成纤维细胞转分化神经元与三维丝蛋白纤维支架组成，且神经元的神经突起相互连接形成神经网络。