[发明专利]一种基于液晶变焦透镜的光切片显微成像方法和装置在审
| 申请号: | 201910984427.2 | 申请日: | 2019-10-16 |
| 公开(公告)号: | CN110836877A | 公开(公告)日: | 2020-02-25 |
| 发明(设计)人: | 匡翠方;甘艳红;徐良;刘旭;李海峰;崔志英;毛磊;张克奇 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
| 主分类号: | G01N21/64 | 分类号: | G01N21/64 |
| 代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人: | 米志鹏 |
| 地址: | 310013 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 基于 液晶 变焦 透镜 切片 显微 成像 方法 装置 | ||
1.一种基于液晶变焦透镜的光切片显微成像方法,其特征在于:包括以下步骤:
1)激光光束经过扩束后入射扫描振镜;
2)控制扫描振镜振动,使入射激光经过照明物镜后沿y向振动形成虚拟光片;
3)改变变焦透镜的焦距,使光片聚焦在样品不同x向区域,并利用探测物镜收集样品不同x向照明区域激发的荧光;
4)移动样品,使光片照明样品不同z向切面,探测物镜收集样品不同z向切面激发的荧光;
5)利用多幅荧光强度图像进行数据处理,重构得到样品三维图像。
2.如权利要求1所述的基于液晶变焦透镜的光切片显微成像方法,其特征在于:在步骤3)中,所用变焦透镜为液晶变焦透镜,通过调节液晶变焦透镜的输入电流,改变液晶变焦透镜的焦距。
3.如权利要求1或2所述的基于液晶变焦透镜的光切片显微成像方法,其特征在于:至少改变激光的聚焦位置三次,在x向上分段多次照明样品。
4.如权利要求1所述的基于液晶变焦透镜的光切片显微成像方法,其特征在于:所述x向为照明光轴方向;z向为沿着探测光轴方向;y向为垂直于照明光轴和探测光轴方向;x向、y向和z向两两相互垂直。
5.如权利要求1所述的基于液晶变焦透镜的光切片显微成像方法,其特征在于:所述的照明物镜与探测物镜正交放置。
6.一种基于液晶变焦透镜的光切片显微成像装置,包括激发光路模块和探测光路模块,其特征在于:
所述的激发光路模块包括依次布置的:
激光器,发出激光光束;
扩束透镜组,对入射激光进行扩束;
扫描振镜,用于控制光束进行y向振动,形成虚拟光片;
扫描透镜,用于配合扫描振镜对样品进行y方向扫描;
变焦透镜,用于改变激光光束在样品x向的聚焦位置;
压电移动平台,用于沿z向移动样品,使样品不同z切面被照明;
照明物镜,用于将入射激光聚焦到样品进行照明,激发荧光;
所述的探测光路模块包括:
探测物镜,用于收集不同样品平面上被激发的荧光信号;
sCMOS相机,用于收集所述样品激发的荧光强度信号并成像;
计算机,用于控制所述的扫描振镜、变焦透镜和压电移动平台,分别改变对样品的y向、x向和z向上的扫描位置,控制sCMOS相机采集荧光信号,最终提取有效信息并重构样品三维图像。
7.如权利要求6所述的基于液晶变焦透镜的光切片显微成像装置,其特征在于:所用变焦透镜为液晶变焦透镜,通过调节液晶变焦透镜的输入电流,改变液晶变焦透镜的焦距。
8.如权利要求6所述的基于液晶变焦透镜的光切片显微成像装置,其特征在于:所述的照明物镜与探测物镜正交摆放。
9.如权利要求6所述的基于液晶变焦透镜的光切片显微成像装置,其特征在于:所述sCMOS相机由计算机模块控制,与扫描振镜同步工作,以卷帘模式逐行曝光每行像素,并记录样品激发的荧光信号。
10.如权利要求6所述的基于液晶变焦透镜的光切片显微成像装置,其特征在于:所述的激发光路模块可以包括两束照明光路实现双边照明:
扩束后的激光光束可经过分束系统进行分束,形成所述的两束照明光路,每束照明光路上依次设置有:扫描振镜、扫描透镜、变焦透镜和照明物镜;
两束照明光路内的照明光束由计算机控制同步照明样品,激发荧光。
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