[发明专利]一种呼肠孤病毒和细小病毒卵黄抗体锭及其制备方法

说明书

本发明提供了一种呼肠孤病毒和细小病毒卵黄抗体锭及其制备方法，属于卵黄抗体锭领域。本发明采用锭制剂提取的新型呼肠孤病毒和细小病毒卵黄抗体提取率高，依次通过稀释、过滤、沉淀脂类、沉淀抗体、制软材包被、压锭的步骤，制备的卵黄抗体的纯度高，提取效率好，本发明制备的卵黄抗体在预防和治疗畜禽疾病方面具有特异性强、作用迅速、无残留等优点，尤其是在治疗与预防水禽呼肠孤病毒、细小病毒具有极佳疗效，而且，本发明的方法可以得到了广泛应用。本发明的方法来源广泛、成本低、无过敏反应且有营养作用，高免卵黄抗体锭,易于保存、运输和应用，可以用于制成各种畜禽疾病，尤其是水禽的呼肠孤病毒、细小病毒的治疗药物。

技术领域

本发明涉及卵黄抗体锭技术领域，尤其涉及一种呼肠孤病毒和细小病毒卵黄抗体锭及其制备方法。

背景技术

水禽的新型呼肠孤病毒、细小病发病率和死亡率都很高，不仅给养殖业带来很大的危害，而且危及人类的健康。呼肠孤病毒有多种血清型，容易产生耐药性，给疾病的治疗带来了难度。尤其在现代规模化、集约化养殖小区更容易引发此病，还常和鸭肝病毒、禽流感等混合感染，引起大批量死亡，给养殖生产带来巨大的经济损失。水禽呼肠孤病毒和细小病毒目前国内主要采用灭活疫苗，但其使用效果存在差异，且抗体保护时间短，需多次免疫才能获得较强的免疫力。而水禽呼肠孤病毒和细小病毒传染迅速，致病性高，目前还无复合有显著免疫保护力的疫苗可用，灭活苗起效慢，复合抗体有效补充免疫空白期，起效快，效果明显。所以水禽的呼肠孤病毒、细小病毒的抗体属于空白。

卵黄抗体在预防和治疗畜禽疾病方面具有特异性强、作用迅速、无残留等优点，得到了广泛应用。而且，从免疫预防和治疗角度考虑，高免卵黄具有此功效，其来源广泛、成本低、无过敏反应且有营养作用。高免卵黄抗体锭易于保存、运输和应用，在临床试验中已初见成效。因此，如何提取和保存卵黄抗体有效效价，对于卵黄的应用至关重要。现有的提取方法为简单的酸化水法，分离率低，提取效价不稳定。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种呼肠孤病毒和细小病毒卵黄抗体锭及其制备方法。本发明制得的呼肠孤病毒和细小病毒卵黄抗体锭能有效保证抗体的效价，且能够提高抗体的吸收利用率。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种呼肠孤病毒和细小病毒卵黄抗体锭的制备方法，包括以下步骤：

(1)饲养免疫鸡苗：选取健康的25周龄的鸡苗，隔离饲养，并在所述鸡苗的鸡翅下肌肉注射呼肠孤病毒和细小病毒灭活疫苗进行首免，然后分别进行强化免疫，所述首免后检测鸡苗的血清中抗体水平达10log2～14log2时收集鸡蛋；

(2)鸡蛋的消毒冷藏：将所述鸡蛋依次进行清洗、消毒、晾干，然后置于4℃下冷藏；

(3)收集蛋黄：将所述步骤(2)冷藏后的鸡蛋打蛋，并在4℃且无菌的条件下将蛋清与蛋黄分离，取蛋黄，将蛋黄搅拌均匀；

(4)稀释蛋黄液：将所述步骤(3)蛋黄与水混合后置于4℃的冷藏室内静置，得到稀释蛋黄液；

(5)过滤：将所述步骤(4)蛋黄稀释液过滤，取过滤液；

(6)沉淀脂类物质：将所述步骤(5)过滤液、生理盐水与羧甲基纤维素混合进行沉淀，得到上清液；

(7)过滤：将所述步骤(6)上清液过滤，取过滤液；

(8)沉淀抗体物质：将所述步骤(7)过滤液与硫酸钠混合进行沉淀，取固体物质；

(9)制锭：将所述步骤(8)固体物质、辅料、蔗糖以及β-环糊精混合，得到软材，然后依次制粒、干燥和压制成锭，得到所述呼肠孤病毒和细小病毒卵黄抗体锭。

优选地，所述步骤(4)中蛋黄与水的体积比为1:2～4。