[发明专利]一种基于核酸适配体修饰纳米金的环丙氨嗪检测方法有效
| 申请号: | 201910934458.7 | 申请日: | 2019-09-29 |
| 公开(公告)号: | CN110567952B | 公开(公告)日: | 2021-05-11 |
| 发明(设计)人: | 邢海波;费雪莲;党旭;殷潘成 | 申请(专利权)人: | 上海应用技术大学 |
| 主分类号: | G01N21/78 | 分类号: | G01N21/78;G01N21/33 |
| 代理公司: | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人: | 吴文滨 |
| 地址: | 201418 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 基于 核酸 适配体 修饰 纳米 环丙氨嗪 检测 方法 | ||
1.一种基于核酸适配体修饰纳米金的环丙氨嗪检测方法,该检测方法用于检测待测液中是否含有三聚氰胺或环丙氨嗪,并获得待测液中环丙氨嗪的含量,其特征在于,所述的检测方法包括以下步骤:
1)将待测液加入至纳米金检测液中,判断纳米金检测液是否变色;
若纳米金检测液变色,则待测液中含有三聚氰胺或环丙氨嗪中的至少一种,并进行步骤2);
若纳米金检测液不变色,则待测液中既不含三聚氰胺,也不含环丙氨嗪,检测过程结束;
2)将待测液加入至核酸适配体修饰纳米金检测液中,判断核酸适配体修饰纳米金检测液是否变色;
若核酸适配体修饰纳米金检测液变色,则待测液中含有三聚氰胺,并进行步骤3);
若核酸适配体修饰纳米金检测液不变色,则待测液中不含有三聚氰胺,而含有环丙氨嗪,并进行步骤4);
3)将待测液加入至含CTAB的核酸适配体修饰纳米金检测液中,判断含CTAB的核酸适配体修饰纳米金检测液是否变色;
若含CTAB的核酸适配体修饰纳米金检测液变色,则待测液中同时含有三聚氰胺及环丙氨嗪,并进行步骤4);
若含CTAB的核酸适配体修饰纳米金检测液不变色,则待测液中只含有三聚氰胺,检测过程结束;
4)将待测液与含CTAB的核酸适配体修饰纳米金检测液的混合液进行吸光度测试,并根据吸光度得到待测液中环丙氨嗪的含量;
所述的核酸适配体的序列为GGTTGGTTGGTTGGTT。
2.根据权利要求1所述的一种基于核酸适配体修饰纳米金的环丙氨嗪检测方法,其特征在于,步骤1)中,所述的待测液与纳米金检测液的体积比为1:(0.8-1.2)。
3.根据权利要求1所述的一种基于核酸适配体修饰纳米金的环丙氨嗪检测方法,其特征在于,步骤1)中,所述的纳米金检测液中,纳米金的粒径为15-30nm,纳米金的浓度为8-12mg/mL,纳米金检测液的溶剂为水。
4.根据权利要求1所述的一种基于核酸适配体修饰纳米金的环丙氨嗪检测方法,其特征在于,步骤2)中,所述的待测液与核酸适配体修饰纳米金检测液的体积比为1:(0.8-1.2)。
5.根据权利要求1所述的一种基于核酸适配体修饰纳米金的环丙氨嗪检测方法,其特征在于,步骤2)中,所述的核酸适配体修饰纳米金检测液的制备方法为:在浓度为8-12mg/mL的纳米金溶液中加入(0.5-1.5)×104nM的核酸适配体溶液,之后在水浴25-35℃条件下反应20-40min,即得到核酸适配体修饰纳米金检测液,其中,所述的核酸适配体溶液的加入量为4-6μL/3mL纳米金溶液。
6.根据权利要求1所述的一种基于核酸适配体修饰纳米金的环丙氨嗪检测方法,其特征在于,步骤3)中,所述的待测液与含CTAB的核酸适配体修饰纳米金检测液的体积比为1:(0.8-1.2)。
7.根据权利要求1所述的一种基于核酸适配体修饰纳米金的环丙氨嗪检测方法,其特征在于,步骤3)中,所述的含CTAB的核酸适配体修饰纳米金检测液的制备方法为:在浓度为8-12mg/mL的纳米金溶液中加入(0.5-1.5)×104nM的核酸适配体溶液,并在水浴25-35℃条件下反应20-40min,这样可以让适配体更好的包裹纳米金同时本身不会失活;再加入(0.5-1.5)×103nM的CTAB溶液,混合均匀后,即得到含CTAB的核酸适配体修饰纳米金检测液,其中,所述的核酸适配体溶液的加入量为4-6μL/3mL纳米金溶液,所述的CTAB溶液的加入量为2-4μL/3mL纳米金溶液。
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