[发明专利]一种抗双链DNA抗体检测试剂

说明书

本发明提供了一种抗双链DNA抗体检测试剂盒，包括包被双链DNA抗原的磁微粒、碱性磷酸酶标记抗体和化学发光底物；所述磁微粒为二氧化硅磁性复合微粒。本发明提供的抗双链DNA抗体检测试剂具有较高的检测灵敏度，较低的检测误差并且检测时间较短的优点，可快速而精确地进行检测。

技术领域

本发明属于检测技术领域，涉及一种抗双链DNA抗体检测试剂。

背景技术

抗双链DNA抗体是抗DNA抗体中的一种，是系统性红斑狼疮(SLE)的血清学标志物，而且是临床上最常进行的一项实验室检测指标。对于系统性红斑狼疮的诊断而言，抗双链DNA抗体具有相当高的特异性，容易被检测，同时与系统性红斑狼疮又有一定的联系，会随着该疾病的活动程度而发生变化，因此，对双链DNA抗体进行检测，可快速准确的判断系统性红斑狼疮。

目前进行诊断检测的方法主要有化学发光分析法、酶联免疫吸附测定、胶体金免疫层析法、免疫荧光分析法、间接免疫荧光法等。其中在临床上应用最为广泛的是间接免疫荧光法，该方法以绿蝇短膜虫虫体为包被基质，其上只含有一个单纯的、完整的dsDNA分子，不含有任何其他物质，特异性好；由于只结合血清中的高亲和力抗体，故灵敏度有一定限制，并且其过程包括手工操作和荧光显微镜观察，同时需要丰富的经验，受到多种因素的影响。免疫印迹法综合了十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳高分辨率和酶免疫吸附技术的高特异度，广泛用于组抗原成分分析，但是此方法检测抗ds-DNA抗体敏感性较低。

CN101776682A公开了一种双链DNA抗原的制备方法和检测人血清抗双链DNA抗体的试剂盒。该方法包括(1)使用含有Tris、EDTA盐和RNase A的缓冲液P1处理质粒DNA，离心除去上清后再加入该缓冲液P1悬浮；(2)使用含SDS和碱金属离子的碱性缓冲液P2处理步骤(1)所得悬浮物；和(3)使用含醋酸钾的缓冲液P3处理步骤(2)的产物，离心获得上清，上清过滤后用异丙醇处理，离心得到沉淀。该专利提供的抗原成本低廉并且具有稳定可靠的抗原性能，但是其对抗双链DNA抗体的敏感度不够高。CN109444404A提供了一种抗双链DNA抗体快速检测方法，DNA提取步骤包括：生物素标记双链DNA抗原、荧光标记鼠抗人免疫球蛋白G、制备试纸条和样本稀释液、测定，利用离心管、离心机、水浴箱、电子pH计、荧光免疫分析仪、连接点膜喷金一体机，再加上相应的试剂和材料进行快速而准确地检测；该专利提供的试纸条在进行检测时，检测时间较短，但是其灵敏度仍不够高。

因此，需要提供一种新的检测试剂，以提高对抗双链DNA抗体的检测灵敏度。

发明内容

本发明的目的在于提供一种抗双链DNA抗体检测试剂。本发明提供的抗双链DNA抗体检测试剂具有较高的检测灵敏度，较低的检测误差并且检测时间较短的优点，可快速而精确地进行检测。

为达此目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供了一种抗双链DNA抗体检测试剂，包括包被双链DNA抗原的磁微粒、碱性磷酸酶标记抗体和化学发光底物；

所述磁微粒为二氧化硅磁性复合微粒。

本发明特异性的选择二氧化硅磁性复合微粒包被双链DNA抗原，包被性能好，进而使检测试剂的检测误差小；同时本发明选择化学发光标记物作为定量分析的判断标准，具有发光时间长、强度高，在发光时间内变化小的特点。

包被性能较好，有利于后续对待测样品检测时，不会由于包被的问题而增大检测误差。

在本发明中，所述二氧化硅磁性复合微粒包括二氧化硅壳层和磁性三氧化二铁纳米内核。

优选地，所述磁微粒的粒径为0.5-2μm，例如0.8μm、1.0μm、1.2μm、1.4μm、1.5μm、1.6μm、1.8μm等，进一步优选1-1.5μm，例如1.1μm、1.2μm、1.3μm、1.4μm等。

本发明的二氧化硅磁性复合微粒为现有技术中可获得的磁微球。