[发明专利]一种金枪鱼鱼精蛋白的制备方法

说明书

本发明关于一种金枪鱼鱼精蛋白的制备方法，包括：1)金枪鱼精巢匀浆，以乙酸乙酯浸泡，搅拌后过滤烘干并粉碎；2)金枪鱼鱼精干燥粉末中加入NaCl和柠檬酸钠的混合溶液，均质匀浆后低速搅拌，静置后高速离心分离取沉淀；3)在步骤2)的沉淀物中加入硫酸溶液提取，上清液过滤；用冷乙醇沉淀，沉淀用丙酮洗涤后冷冻干燥得粗品；4)粗品配成溶液注入CM Sephaorse CL‑6B洗脱纯化冷冻干燥即得纯品。本发明方法制备金枪鱼鱼精蛋白得率可达15％以上，纯品蛋白浓度高，氨基酸总量可达77％左右，鱼精蛋白中和肝素时效价大概是标品对照品的2/3，测定RSD小于5％，符合各国药典的规定，可用作安全的肝素解毒剂。

技术领域

本发明关于金枪鱼蛋白技术领域，特别是关于一种金枪鱼鱼精蛋白的制备方法。

背景技术

金枪鱼是硬骨鱼纲(Osteichthyes)、鲈形目(Pereiformes)、鲭科(Scombridae)，鱼类中某几个属金枪鱼属(Thunnus)、舵鲣属(Auxis)、鲔属(Euthynnus)、狐鲣属(Sarda)、鲣属(Katsuwonus)、裸狐鲣属(Gymnosarda)的统称，从渔业利用的角度可以将金枪鱼分为：黄鳍金枪鱼、大眼金枪鱼、蓝鳍金枪鱼、长鳍金枪鱼、鲣鱼和马苏金枪鱼6种。金枪鱼肉质柔嫩、鲜美，蛋白质含量很高；富含二十二碳六烯酸(DHA)、二十碳五烯酸(EPA)等具有生物活性的多不饱和脂肪酸；同时，甲硫氨酸、牛磺酸、矿物质和维生素的含量丰富，是国际营养协会推荐的绿色无污染健康美食。

近年来，鱼精蛋白在食品工业中得到了越来越广泛的应用。与化学合成防腐剂相比，鱼精蛋白具有安全性高、防腐性能好、热稳定性高等优点，而且，鱼精蛋白还具有很高的营养性和功能性，能降血压、助呼吸、促消化、抑肿瘤、抗血栓、强化肝功能、抑制血液凝固等。在医学领域里，鱼精蛋白也得到了广泛应用，它可延迟或阻止胰岛素释放，或作为肝素解毒剂等。金枪鱼卵巢为金枪鱼加工废弃物，含有丰富的鱼精蛋白，但并未进行利用。基于此，申请人以金枪鱼卵巢为材料制备鱼精蛋白，并建立了起成熟的制备工艺。

以上背景技术内容的公开仅用于辅助理解本发明的发明构思及技术方案，其并不必然属于本专利申请的现有技术，在没有明确的证据表明上述内容在本专利申请的申请日已经公开的情况下，上述背景技术不应当用于评价本申请的新颖性和创造性。

发明内容

本发明的目的在于提供一种金枪鱼鱼精蛋白的制备方法，依据本发明方法制备金枪鱼鱼精蛋白，蛋白得率可达15％以上，纯品蛋白浓度高，氨基酸总量可达77％左右，鱼精蛋白中和肝素时效价大概是标品对照品的2/3，测定RSD小于5％，符合各国药典的规定，可用作安全的肝素解毒剂。

本发明为实现上述目的所采取的技术方案为：一种金枪鱼鱼精蛋白的制备方法，包括以下步骤：

1)预处理：金枪鱼精巢室温解冻、匀浆，以乙酸乙酯浸泡，间歇性高速搅拌24h，过滤烘干，最后粉碎；

2)盐匀浆：金枪鱼鱼精干燥粉末中加入0.1～0.12MNaCl和0.08～0.12M柠檬酸钠的混合溶液，均质匀浆后低速搅拌，静置后高速离心分离并取沉淀；

3)酸解：在步骤2)的沉淀物中加入硫酸溶液提取，0℃下以4800～6000r/min离心10min，上清液过滤；用三倍体积的冷乙醇沉淀，沉淀用丙酮洗涤两次，冷冻干燥，得鱼精蛋白粗品；

4)纯化：鱼精蛋白粗品配成溶液注入CM Sephaorse CL-6B，以含有NaCl的CH₃COOH-CH₃COONa溶液进行线性梯度洗脱，以4mL/管收集，合并每次收集的相同洗脱峰，透析除盐24h后，减压旋蒸，冷冻干燥即得鱼精蛋白纯品。