[发明专利]一种响应面法优化从香蕉中提取5-羟色胺的工艺方法

权利要求书

1.一种响应面法优化从香蕉中提取5-羟色胺的工艺方法，其特征在于，该方法包括下述步骤：

前处理：将七成熟香蕉去皮后将果肉切片，用0.4%硫酸氢钠、0.3%柠檬酸、0.4%氯化钠混合溶液护色，晾干表面水分再经干燥、粉碎、过筛得到香蕉粉末；

提取：将香蕉粉末与体积分数为72%的乙醇溶液按料液比1 g:20 mL混合，在32℃下超声提取33min，离心分离后上清液即为5-羟色胺粗提液；

上述提取香蕉5-羟色胺的最佳工艺参数按下述方法得出：提取过程中，首先确定乙醇体积分数、料液比、超声时间和超声温度等四个因素，在其中三因素条件固定的情况下，对5-羟色胺提取收率的单因素最大值，然后在单因素实验结果的基础上，考虑到因素间的交互影响，选择其中乙醇体积分数、超声时间和超声温度等三因素作为自变量，以5-羟色胺提取收率为响应值，进行三因素三水平的Box-Behnken中心组合试验设计，通过响应面法对5-羟色胺提取最佳工艺参数进行优化实验；最后利用Design Expert 8.0.6软件对优化实验结果进行多元回归分析，得到香蕉果肉干粉5-羟色胺提取收率Y对乙醇体积分数A、超声时间B、超声温度C的二元多项回归方程：

Y=33.56+2.96A−0.58B+2.20C+0.81AB+1.17AC−0.71BC−5.67A²−0.38B²−7.19C²。

2.根据权利要求1所述的一种响应面法优化从香蕉中提取5-羟色胺的工艺方法，其特征在于，在前处理步骤中，护色温度为60℃，护色的时间为30min。

3.根据权利要求1所述的一种响应面法优化从香蕉中提取5-羟色胺的工艺方法，其特征在于，在前处理步骤中，干燥的温度60℃，干燥的时间为10h。

4.根据权利要求1所述的一种响应面法优化从香蕉中提取5-羟色胺的工艺方法，其特征在于，在前处理步骤中，过筛为过40目筛。

5.根据权利要求1所述的一种响应面法优化从香蕉中提取5-羟色胺的工艺方法，其特征在于，在提取步骤中，测定提取收率的方法：

将粗提液转移至10mL容量瓶，以体积分数为72%的乙醇溶液定容，采用埃尔利希试剂分光光度法，在最大吸收波长584mn处测定吸光值，通过下式计算5-羟色胺的提取收率：

提取收率（以5-羟色胺对照品计，mg /g）=c×V×n /m；

式中：c为标准曲线回归方程求得的样品溶液中5-羟色胺的浓度g/L；

V为样品溶液定容体积mL；

n为稀释倍数；

m为香蕉果肉干粉的质量g。

6.根据权利要求5所述的一种响应面法优化从香蕉中提取5-羟色胺的工艺方法，其特征在于，埃尔利希试剂分光光度法制作5-羟色胺标准曲线的步骤为：准确称取0.0050g的5-羟色胺对照品，用甲醇配制成2.84mmol/L的5-羟色胺标准溶液；分别移取0.00、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50、0.60、0.70、0.80、0.90、1.00mL 5-羟色胺标准溶液于11个10mL容量瓶，用0.1mol/LHCl溶液稀释至4mL，再各加入显色剂埃尔利希试剂5mL，于50℃水浴显色30min，取出冷却至室温，用0.1mol/LHCl溶液定容，以试剂空白为对照，在500～640nm波长范围内经扫描获得的484nm处测定吸光度；以最小二乘回归法求出标准曲线的回归方程y=0.5578x+0.023，线性相关系数的平方为0.9993。