[发明专利]一种驴胎盘活性多肽的制备方法

权利要求书

1.一种驴胎盘活性多肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤100、选取新鲜驴胎盘组织进行清洗剪碎工序后，置于缓冲液中进行匀浆工序和离心工序，获得上清液，所述缓冲液为Tris-HCl缓冲液；

所述Tris-HCl缓冲液的浓度为10 mmol/L-100 mmol/L，pH值为6.0-9.0；所述Tris-HCl缓冲液中含氯化钠和乙醇，其中，氯化钠的浓度为100 mmol/L-200 mmol/L；乙醇的浓度为40g/L-120 g/L；

步骤200、向所述上清液中加入蛋白酶进行酶解反应，获得酶解液；

所述蛋白酶为木瓜蛋白酶和胰蛋白酶的组合蛋白酶，组合蛋白酶的添加量为60 U/mL-1000 U/mL，反应pH值为6.0-9.0，反应温度为35 ℃-55 ℃，反应时间为1.5h-3h；

步骤300、将所述酶解液升温进行酶灭活处理工序，获得驴胎盘活性多肽液；

步骤400、将所述驴胎盘活性多肽液进行冷冻干燥处理，获得驴胎盘活性多肽干粉；

其中，冷冻干燥处理的方法包括如下步骤：

步骤401、在方形容器内表面贴上一层离型保护膜，在所述容器中有序排列满多个蜂窝立方体；

步骤402、将驴胎盘活性多肽液倒入所述容器中，并与最上层的蜂窝立方体上表面齐平；

步骤403、将容器置于-15℃～-2℃的环境下冷冻成型，在低温环境下倒出冷冻蜂窝立方体至消毒后的无菌容器中，还包括将整个所述的冷冻蜂窝立方体切开成单个的冷冻蜂窝立方体，并倾斜放置分布在所述无菌容器中，且所述无菌容器四周壁面为多孔状结构；

步骤404、将装有所述冷冻蜂窝立方体的所述无菌容器置于无菌环境下抽真空将水分升华干燥；

步骤405、取出无菌容器晃动，即可得到干燥的驴胎盘活性多肽粗干粉；

步骤406、根据需求，将驴胎盘活性多肽粗干粉进行二次处理以获取细小均匀的驴胎盘活性多肽粗粉。

2.根据权利要求1所述的一种驴胎盘活性多肽的制备方法，其特征在于，所述缓冲液与驴胎盘组织的湿重比例为10：1。

3.根据权利要求1所述的一种驴胎盘活性多肽的制备方法，其特征在于，所述匀浆工序的时间为10 min-60 min，匀浆温度为0 ℃-8 ℃。

4.根据权利要求1所述的一种驴胎盘活性多肽的制备方法，其特征在于，所述酶灭活处理工序的温度为95 ℃-105 ℃，灭活时间为10 min -20 min。