[发明专利]一种基于荧光共振能量转移的共轭聚合物纳米粒子荧光探针及在检测谷胱甘肽中的应用

权利要求书

1.一种共轭聚合物纳米粒子荧光探针，其特征在于，所述共轭聚合物纳米粒子荧光探针包括羧基化的共轭聚合物纳米粒子（CPNs-PBEC-COOH）和MnO₂纳米片；

其中，所述羧基化的共轭聚合物纳米粒子CPNs-PBEC-COOH，其制备方法如下：

PBEC和功能聚合物PSMA溶于四氢呋喃；进行超声，形成均匀溶液，然后，在超声的条件下快速加入超纯水超声，除去四氢呋喃，过滤即得；

所述PBEC结构式如下：

所述PSMA结构式如下：

。

2.如权利要求1所述的共轭聚合物纳米粒子荧光探针，其特征在于，所述PBEC的n为大于0的自然数，优选为大于40的自然数，进一步优选为44，所述PBEC结构单元分子量为607。

3.如权利要求1所述的共轭聚合物纳米粒子荧光探针，其特征在于，所述PBEC的制备方法，包括：

将四乙基(2,5’-二(乙基己基)-1,4’-亚苯基)二(亚甲基)二磷酸酯加入到除水的四氢呋喃中，并氮气保护，反应混合物保持在冷浴下，然后将叔丁醇钾加入到混合物中，并持续氮气保护，继续搅拌后移至油浴，加入9-乙基-3,6’-二甲酰基-咔唑，继续氮气保护反应，反应完成后倒入水中，并用二氯甲烷萃取，减压蒸馏除去二氯甲烷，残渣用四氢呋喃和正己烷分级沉淀法提纯，得橘黄色固体即PBEC。

4.如权利要求3所述的共轭聚合物纳米粒子荧光探针，其特征在于，所述四乙基(2,5’-二(乙基己基)-1,4’-亚苯基)二(亚甲基)二磷酸酯、叔丁醇钾与9-乙基-3,6’-二甲酰基-咔唑的质量比为0.3~0.5：0.1~0.4：0.1~0.4（优选为0.3：0.2：0.2）。

5.如权利要求1所述的共轭聚合物纳米粒子荧光探针，其特征在于，所述PBEC与PSMA的浓度比为40~55 μg·mL^-1: 10 μg·mL^-1（优选为50 μg·mL^-1:10 μg·mL^-1）。

6.如权利要求1所述的共轭聚合物纳米粒子荧光探针，其特征在于，所述共轭聚合物纳米粒子荧光探针包括羧基化的共轭聚合物纳米粒子（CPNs-PBEC-COOH）和MnO₂纳米片；

其中，所述MnO₂纳米片，其制备方法如下：

在一个典型的合成中，将含有12 mL的四甲基铵(TMA, 1.0 M 在水溶液里 )和2 mLH₂O₂ (30% wt%在水溶液里)的混合物20 mL在15秒内加入10 mL 0.593 g MnCl₂•H₂O(99.99%)水溶液中。制备好的深褐色悬浮液在室温下剧烈搅拌了一夜。用乙醇和水交替清洗几遍，最终分散于水中，即得到MnO₂纳米片。

7.权利要求1-6任一项所述共轭聚合物纳米粒子荧光探针在检测谷胱甘肽中的应用。

8.一种谷胱甘肽的检测方法，其特征在于，所述方法包括：

将CPNs-PBEC-COOH 溶液和MnO₂纳米片在室温下孵育处理；

向孵育处理后的溶液中加入待测样品进行荧光定量检测。

9.如权利要求8所述的检测方法，其特征在于，所述CPNs-PBEC-COOH 与MnO₂纳米片的质量浓度比为1 μg·mL^-1：2~100 μg·mL^-1（优选为1 μg·mL^-1：100 μg·mL^-1）。