[发明专利]蒲公英多种活性成分的同时检测方法

权利要求书

1.一种蒲公英多种活性成分的同时检测方法，所述活性成分包括咖啡酸、芹菜素、芦丁、槲皮素和山奈酚，其特征在于，所述检测方法包括以下步骤：

1)将蒲公英晒干，磨成粉末，置于具塞锥形瓶中，加入甲醇，超声处理，取出，冷却，摇匀，过滤，获得滤液A；滤液A添加无水碳酸钠，搅拌60min，加入羧基化聚苯乙烯微球，震荡30min，过滤，收集滤液，将上述羧基化聚苯乙烯微球添加到甲醇中，震荡10min，过滤，收集滤液，将滤液合并，以备进行蒸发浓缩；

2)所述滤液A蒸发浓缩后用乙醇溶解，过滤，获得滤液B，滤液B上大孔树脂，用水洗脱至溶液澄清，再用乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，蒸发浓缩，获得浸膏，使用甲醇溶解所述浸膏，过滤，获得供试品溶液；

3)使用液相色谱对供试品溶液进行上机检测，根据对照品的检测结果计算获得蒲公英中咖啡酸、芹菜素、芦丁、槲皮素和山奈酚的含量。

2.根据权利要求1所述的蒲公英多种活性成分的同时检测方法，其特征在于，对照品工作液的配置方法为：称取咖啡酸、芹菜素、芦丁、槲皮素和山奈酚，置于容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，配制成质量浓度分别为0.1mg/mL、0.1mg/mL、0.05mg/mL、0.1mg/mL和0.1mg/mL的混合对照品母液，将所述混合对照品母液逐级稀释，配成混合对照品工作液。

3.根据权利要求1所述的蒲公英多种活性成分的同时检测方法，其特征在于，所述液相色谱的条件为色谱柱：Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18，柱温35℃；流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液，流速为1mL/min；吸收波长：323nm；梯度洗脱。

4.根据权利要求3所述的蒲公英多种活性成分的同时检测方法，其特征在于，梯度洗脱的方法为：0-10min，甲醇在流动相中的体积比为15％增加到20％，磷酸盐缓冲液在流动相中的体积比为85％下降到80％；10-25min，甲醇在流动相中的体积比为20％增加到35％，磷酸盐缓冲液在流动相中的体积比为80％下降到65％；25-30min，甲醇在流动相中的体积比为35％增加到40％，磷酸盐缓冲液在流动相中的体积比为65％下降到60％；30-45min，甲醇在流动相中的体积比为40％增加到50％，磷酸盐缓冲液在流动相中的体积比为60％下降到50％；45-60min，甲醇在流动相中的体积比为50％增加到65％，磷酸盐缓冲液在流动相中的体积比为50％下降到35％；60-70min，甲醇在流动相中的体积比为65％，磷酸盐缓冲液在流动相中的体积比为35％；70min测试结束。

5.根据权利要求1所述的蒲公英多种活性成分的同时检测方法，其特征在于，所述滤液A蒸发浓缩后用体积分数为20％的乙醇溶液溶解。

6.根据权利要求1所述的蒲公英多种活性成分的同时检测方法，其特征在于，滤液B上大孔树脂，用水洗脱至溶液澄清，再用体积分数为80％的乙醇溶液洗脱。

7.根据权利要求1所述的蒲公英多种活性成分的同时检测方法，其特征在于，超声波处理的时间为30-40min。