[发明专利]一种山药酵素液的制备及其中游离氨基酸的检测方法

权利要求书

1.一种山药酵素液的制备方法，首先对山药进行清洗、晾干处理，制得山药汁，然后对制得的山药汁进行发酵处理，其特征在于，发酵处理的过程如下：

1）对山药汁进行调配，加入适量蔗糖，调节糖浓度为8-12%，再加入1.0-1.4%的蛋白胨，搅拌均匀后，调节山药汁的初始pH 5.0；

2）高压灭菌处理，温度120-125°C，压力100kpa，灭菌20 min，冷却；

3）在经高压灭菌处理、冷却后的山药发酵基质中接种0.1-0.4%的活化后的酵母菌液，在28 -32°C温度条件下恒温振荡培养，以150 r/min的转速振荡发酵22-26 h；

4）待酵母菌发酵结束后，再接种1-5%的乳酸菌，在33-39°C温度条件下恒温培养，静置发酵32-40 h。

2.根据权利要求1所述的山药酵素液的制备方法，其特征在于：山药汁的制备过程如下：

1）挑选新鲜、无腐烂的山药，洗净后晾干，削皮切成大约2至3厘米的小块，进行护色处理，加入0.6%的柠檬酸、0.4%的植酸、1.25%的氯化钙；

2）称取去皮后的山药质量后，按料液比1：4加纯净水，用打浆机打浆，打浆后，在70°C水浴锅中水浴15 min，冷却后用纱布过滤，即得到山药汁。

3.一种反相高效液相色谱检测山药酵素液中游离氨基酸的方法，其特征在于：包括以下步骤：

1）山药酵素液前处理：

取山药酵素液于50 mL离心管中，在高速离心机中以12000 r/min的转速，设置温度20°C，离心时间15 min，取上清液密封保存，用于下一步衍生；

2）标准品及样品的衍生

（1）衍生剂为2，4-二硝基氟苯，衍生温度为60°C，避光反应1 h；

（2）分别配制与处理氨基酸标准品溶液和样品溶液；

（3）反相高效液相色谱检测

以2，4-二硝基氟苯为柱前衍生试剂，使用AcclaimTM120 C18色谱柱，以流动相A为pH4.8、浓度为0.05 mol/L的乙酸钠溶液，流动相B为体积比为1：1的乙腈水溶液，流速为1 mL/min，柱温30°C，检测波长为360 nm，进样量：20 μL；梯度程序洗脱50 min对其氨基酸含量进行检测。