[发明专利]一种P物质诱导的过敏性哮喘动物模型的构建方法和筛选药物的方法有效
| 申请号: | 201910600151.3 | 申请日: | 2019-07-04 |
| 公开(公告)号: | CN110326584B | 公开(公告)日: | 2020-06-19 |
| 发明(设计)人: | 王楠;贺浪冲;贺怀贞;王程;王珏;张永竟 | 申请(专利权)人: | 西安交通大学 |
| 主分类号: | A01K67/02 | 分类号: | A01K67/02;A61K49/00 |
| 代理公司: | 西安通大专利代理有限责任公司 61200 | 代理人: | 王艾华 |
| 地址: | 710049 *** | 国省代码: | 陕西;61 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 物质 诱导 过敏性 哮喘 动物 模型 构建 方法 筛选 药物 | ||
1.一种P物质诱导的过敏性哮喘动物模型的构建方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)将P物质用生理盐水配制成浓度为10~90μg/mL的P物质致敏溶液;
2)在第1天给小鼠通过雾化吸入1~6mL的P物质致敏溶液激发哮喘,吸入时间为20min;
3)间隔一天重复上述步骤2)操作;
4)在最后一次的雾化吸入激发哮喘结束后,在24小时内测定小鼠肺功能相关指标,肺泡灌洗液中细胞因子含量,肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞数量,并取肺组织切片,HE染色,分析数据观察可见:小鼠气道高反应性,肺泡灌洗液中细胞因子含量升高,肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞数量增加,HE染色可见明显的炎性浸润,即成功构建P物质诱导的过敏性哮喘动物模型。
2.根据权利要求1所述的P物质诱导的过敏性哮喘动物模型的构建方法,其特征在于,所述P物质的纯度≥97%。
3.根据权利要求1所述的P物质诱导的过敏性哮喘动物模型的构建方法,其特征在于,所述小鼠为6~8周近交系C57BL/6。
4.根据权利要求1所述的P物质诱导的过敏性哮喘动物模型的构建方法,其特征在于,构建的P物质诱导的过敏性哮喘动物模型的IgE未升高。
5.利用权利要求1~4中任意一项所述的构建方法构建得到的P物质诱导的过敏性哮喘动物模型筛选治疗哮喘药物的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)设置待测药物组、正常对照组、生理盐水组;
(2)对待测药物组和生理盐水组采用P物质诱导的过敏性哮喘动物模型激发,正常对照组以生理盐水雾化激发;
(3)待测药物组和生理盐水组在每次用所述P物质诱导的过敏性哮喘动物模型激发前1小时,灌胃给药;正常对照组在每次用生理盐水雾化激发前1小时,灌胃等量生理盐水;每次激发结束后,24小时内测定小鼠各项肺功能指标,肺泡灌洗液中细胞因子含量,肺泡灌洗液中嗜酸性粒细胞数量,并取肺组织切片,HE染色;
(4)分析步骤(3)得到的数据,对待测药物的治疗效果进行评价。
6.根据权利要求5所述的利用P物质诱导的过敏性哮喘动物模型筛选治疗哮喘药物的方法,其特征在于,分析步骤(4)获得的数据:
若正常对照组记录的数据没有升高,而生理盐水组记录的数据有所升高,表明过敏性哮喘动物模型制备成功;
若待测药物组记录的数据较正常对照组记录的数据受到抑制,则表示待测药物具备治疗哮喘的作用。
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