[发明专利]一种L-丝氨酸的制备方法有效
| 申请号: | 201910593295.0 | 申请日: | 2019-07-02 |
| 公开(公告)号: | CN110205346B | 公开(公告)日: | 2021-04-06 |
| 发明(设计)人: | 梅运军;董文华;张磊;杨奕 | 申请(专利权)人: | 武汉轻工大学 |
| 主分类号: | C12P13/06 | 分类号: | C12P13/06 |
| 代理公司: | 深圳市世纪恒程知识产权代理事务所 44287 | 代理人: | 黄嗣童 |
| 地址: | 430023 湖北省武*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 丝氨酸 制备 方法 | ||
1.一种L-丝氨酸的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
将发酵菌体重悬于去离子水中,加入十六烷基三甲基溴化铵使细胞破碎,得细胞破碎液;
向所述细胞破碎液中加入甘氨酸、5-磷酸吡哆醛、四氢叶酸和甲醛进行酶促转化反应,待达到酶促反应平衡后,向酶促反应平衡液中加入维生素C混合,得酶促反应液;
对所述酶促反应液进行减压浓缩,得浓缩液;
对所述浓缩液进行抽滤,获得L-丝氨酸晶体以及含有5-磷酸吡哆醛和四氢叶酸的抽滤液,所述抽滤液用以参与下一轮的酶促反应;
其中,所述发酵菌体中含有丝氨酸羟甲基转移酶。
2.如权利要求1所述的L-丝氨酸的制备方法,其特征在于,将发酵菌体重悬于去离子水中,加入十六烷基三甲基溴化铵使细胞破碎,得细胞破碎液的步骤,包括:
将发酵菌体重悬于去离子水中,得菌悬液;
向所述菌悬液中加入十六烷基三甲基溴化铵破碎细胞,待细胞破碎后用陶瓷膜过滤去除菌体,并收集滤液,得细胞破碎液。
3.如权利要求2所述的L-丝氨酸的制备方法,其特征在于,将发酵菌体重悬于去离子水中,得菌悬液的步骤中:
所述菌悬液中发酵菌体的浓度为0.07~0.09kg/L。
4.如权利要求2所述的L-丝氨酸的制备方法,其特征在于,向所述菌悬液中加入十六烷基三甲基溴化铵破碎细胞,待细胞破碎后用陶瓷膜过滤去除菌体,并收集滤液,得细胞破碎液的步骤中:
所述十六烷基三甲基溴化铵在所述菌悬液中的质量浓度为0.05~0.2%。
5.如权利要求1所述的L-丝氨酸的制备方法,其特征在于,向所述细胞破碎液中加入甘氨酸、5-磷酸吡哆醛、四氢叶酸和甲醛进行酶促转化反应,待达到酶促反应平衡后,向酶促反应平衡液中加入维生素C混合,得酶促反应液的步骤中:
所述维生素C在所述酶促反应平衡液中的添加浓度为0.15~0.35g/L。
6.如权利要求1所述的L-丝氨酸的制备方法,其特征在于,向所述细胞破碎液中加入甘氨酸、5-磷酸吡哆醛、四氢叶酸和甲醛进行酶促转化反应,待达到酶促反应平衡后,向酶促反应平衡液中加入维生素C混合,得酶促反应液的步骤中:
所述酶促反应体系中,所述甘氨酸、5-磷酸吡哆醛、四氢叶酸和甲醛的浓度对应为2~2.8mol/L、0.2~0.4mmol/L、3~5mmol/L和8~13mmol/L,且所述酶促反应体系的pH值为6.0~8.0。
7.如权利要求1所述的L-丝氨酸的制备方法,其特征在于,向所述细胞破碎液中加入甘氨酸、5-磷酸吡哆醛、四氢叶酸和甲醛进行酶促转化反应,待达到酶促反应平衡后,向酶促反应平衡液中加入维生素C混合,得酶促反应液的步骤中:
所述酶促转化反应过程中的搅拌速率为100~150rpm,反应温度为35~40℃,反应时间为18~24h。
8.如权利要求1所述的L-丝氨酸的制备方法,其特征在于,对所述酶促反应液进行减压浓缩,得浓缩液的步骤,包括:
对所述酶促反应液进行减压浓缩,至浓缩后的体积为原体积的1/6~1/7为止,得浓缩液。
9.如权利要求8所述的L-丝氨酸的制备方法,其特征在于,对所述酶促反应液进行减压浓缩,至浓缩后的体积为原体积的1/6~1/7为止,得浓缩液的步骤中:
所述减压浓缩时的压力为-0.09~-0.08MPa,温度为37~40℃。
10.如权利要求1所述的L-丝氨酸的制备方法,其特征在于,对所述浓缩液进行抽滤,获得L-丝氨酸晶体以及含有5-磷酸吡哆醛和四氢叶酸的抽滤液,所述抽滤液用以参与下一轮的酶促反应的步骤中:
进行所述抽滤时的抽滤压力为-0.05~-0.04MPa,抽滤时间为6~8h,且过滤膜为陶瓷膜。
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