[发明专利]一种番茄灰霉病防治药物光解作用的测定方法

说明书

本发明公开了一种番茄灰霉病防治药物光解作用的测定方法，该方法是将杀菌剂药物与琼脂培养基混合制备成培养平板，进行光照处理而造成药物发生光分解，而药物光解作用导致光处理产物的活性发生变化，通过测试番茄灰霉病菌对光处理产物的反应而显示出药物的光解作用。实施方法步骤如下：1)配备琼脂培养基；2)配制药物平板；3)光处理前药物活性检测；4)光处理；5)光处理后药物活性检测；6)获取光解作用结果。本发明的优点是：1)整体技术简单，无需使用高精仪器设备或者复杂的血清学技术操作；2)能反映药物光解与药效的关系；3)可获得非光解作用导致药物活性变化的信息。

技术领域

本发明涉及杀菌剂光解作用的检测技术，具体是一种番茄灰霉病防治药物光解作用的测定方法。

背景技术

番茄灰霉病是大宗蔬菜番茄的重要病害，病害流行可给番茄生产带来重大损失，当前该病害的防治主要依赖于农药防治。农药防治用的防治药物一旦施用于田间，通常会发生自然降解，而光照作用导致的光分解作用最为突出。因此光解作用与药物的防治效果以及药物残留关系密切。显然，了解药物的光解作用规律对充分发挥药物的防治作用，以及减少药物残留有重要意义。

药物的光解作用的检测技术当前主要是利用理化手段和血清学手段。理化手段是利用药物的化学性质和物理特征，在现代设备仪器中将药物显示和识别，该手段快速灵敏，但需要现代大型精密仪器。血清学手段是将药物转化为抗原以及由此制备抗体，利用抗原-抗体的特异反应将药物显示和识别，该手段也较为灵敏，但需要制备特异抗体。当前的技术手段都有一个共同特点，检测过程仅仅追踪药物原有的分子结构，未涉及药物对防治对象的生物活性，结果无法获得药物降解产物对防治对象的活性是增强或减弱的有关信息，未能反映药物降解与药效的关系。

药物的光分解与否，可直接影响其对防治对象的作用活性，其作用活性可通过影响防治对象的生长发育而得到显示，不过，至今还未有利用药物的生物活性手段作为药物光解作用的检测技术。

发明内容

本发明的目的是利用药物的光解作用导致光处理产物的药物作用效果发生变化，提供一种番茄灰霉病防治药物光解作用的测定方法。

本发明解决上述技术问题的技术方案如下：

一种番茄灰霉病防治药物光解作用的测定方法，是将杀菌剂药物混合于琼脂培养基平板中，并进行光照处理，琼脂平板内的药物在光照作用下发生光分解，光处理产物对番茄灰霉病菌的作用活性发生变化，通过测试番茄灰霉病菌对光处理产物的反应而显示出药物的光解作用，药物光解作用测定方法的步骤如下：

1.配备琼脂培养基：按常规方法配备含琼脂的培养基，常规灭菌备用。

2.配制药物平板：无菌条件下，将药物以适当的比例与步骤1配备的培养基充分混合，并用普通培养皿倒平板，获得药物平板；同样的操作处理但不含药物的培养基平板作为对照平板。

3.光处理前药物活性检测：在步骤2配备的药物平板和对照平板上，定量移植入常规培养准备的番茄灰霉病菌；在23℃的适宜温度条件下培养，测量平板上番茄灰霉病菌的生长量，计算获得药物对番茄灰霉病菌的光处理前抑制率I₀。

4.光处理：用普通封口膜将步骤2的药物平板封口，然后将该封口的药物平板置于设定的光照条件下进行光照处理，同样的药物平板用双层锡箔纸包封作黑暗对照CK处理。

5.光处理后药物活性检测：步骤4的光处理平板经过设定时间t的光处理后，转回无菌条件下拆封口，然后按照步骤3光处理前药物活性检测的操作，进行光处理后药物活性检测；计算获得药物对番茄灰霉病菌的光处理后抑制率It1，以及黑暗对照CK处理的抑制率It2。

6.获取光解作用结果：根据步骤3获得的I₀与步骤5获得的It1和It2，计算获得药物光解作用结果。

本发明的优点是：