[发明专利]一种包含活性生物因子的脂质体及其制备方法

说明书

本发明的目的是提供一种包含活性生物因子的脂质体及其制备方法，所述脂质体的原料为卵磷脂、胆固醇、磷脂酰乙醇胺以及活性生物因子，所述活性生物因子优选为FGF‑2，所述磷脂酰乙醇胺优选为二油酰磷脂酰乙醇胺；所述脂质体通过薄膜分散法制备而成，具有包封率高、稳定性佳、生物活性好的优点，适合作为活性生物因子的载体，有巨大的应用推广价值。

技术领域

本发明属于活性生物因子领域，特别涉及一种包含活性生物因子的脂质体及其制备方法。

背景技术

成纤维细胞生长因子是一种重要的细胞因子，其具有多种生理功能，在生命活动中发挥重要作用。成纤维细胞生长因子家族目前已知包括23个成员，家族成员之间具有30-80％的同源性。目前研究对成纤维细胞生长因子的研究主要集中在FGF-1(a-FGF，酸性成纤维细胞生长因子)、FGF-2(b-FGF，碱性成纤维细胞生长因子)、FGF-13、FGF-21等。

FGF-2即碱性成纤维细胞生长因子最初由牛脑垂体和脑组织提取物中分离得到，能促进2T3细胞的分裂增殖，后续研究表明，FGF-2在体内分布广泛，从垂体、脑、下丘脑、视网膜、肾上腺、胸腺、黄体、肾、心脏、肝脏、胎盘中都能分离得到，并且在多种肿瘤组织中也有表达。人类FGF-2基因为单拷贝基因，定位于4号染色体的短臂上，全长大于40kb，在基因的5’端和3’端都有对基因转录起调控作用的非编码序列，其mRNA长约6802bp，由于翻译起始位点不同而产生一种低Mr FGF-2和4种高Mr FGF-2。

FGF-2是一种多功能细胞因子，如其能够促进细胞有丝分裂、诱导新生血管生成、促进损伤血管内皮细胞修复、促进软组织损伤修复、促进软骨和骨组织损伤修复、促进神经组织修复和再生等。综上，成纤维细胞生长因子尤其是碱性成纤维细胞生长因子具有巨大的临床价值，可用于治疗或辅助治疗多种临床疾病。

成纤维细胞生长因子等外源性活性生物分子在体内半衰期较短，如FGF-2体内的半衰期仅为3-10min，全身或局部给药的效果不能满足临床应用需要。

现有的成纤维细胞生长因子给药技术主要集中在以下几个方面：肝素调控FGF释药技术，即肝素通过共价接枝的方法结合到不同的载体材料，形成肝素-聚合物复合物的新材料，进而包载FGF，或者游离的肝素通过非共价形式直接混入到载体材料中，从而影响药物FGF的释放过程；FGF微球与纳米球；FGF脂质体；FGF胶束；FGF水凝胶等。相对于脂质体，肝素调控FGF释药技术、FGF胶束、FGF水凝胶等给药技术存在制备步骤繁多、技术复杂、成本较高等缺点，而脂质体制备步骤简单、成本低廉，具有广阔的临床推广前景。

脂质体是由磷脂、胆固醇及其它两亲性物质制备而成，由双分子膜形成一层或多层空心的超微型球状载体剂型，其内部为水相的闭合囊泡，脂质体作为药物载体可以延缓药物在体内的释放。但目前的活性生物因子，例如成纤维细胞生长因子尤其是FGF-2的脂质体存在包封率不高、稳定性不佳等不足，存在进一步改进的需求。

发明内容

为解决现有技术中活性生物因子的脂质体包封率不高、稳定性不佳以及生物学活性易降低的缺陷，本发明提供一种包含活性生物因子的脂质体及其制备方法。

具体地，本发明提供了一种包含活性生物因子的脂质体，制备所述脂质体的原料为卵磷脂、胆固醇、磷脂酰乙醇胺以及活性生物因子，优选所述磷脂酰乙醇胺为二油酰磷脂酰乙醇胺。

进一步地，所述卵磷脂为大豆卵磷脂、氢化大豆卵磷脂、蛋黄卵磷脂、二棕榈酰磷脂酰胆碱中的一种或多种，优选为大豆卵磷脂。

进一步地，所述活性生物因子为成纤维细胞生长因子、神经生长因子、表皮细胞生长因子、胰岛素，优选为成纤维细胞生长因子，更优选为FGF-2。

更进一步地，所述脂质体中卵磷脂、胆固醇、二油酰磷脂酰乙醇胺的比例为10-20:3-6:1-2(重量比)；所述比例优选为20:5:1.5。