[发明专利]一种美网柄牛肝菌多糖及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种美网柄牛肝菌多糖及其制备方法和应用。该多糖是自美网柄牛肝菌子实体依次通过水提醇沉、除蛋白、离子交换柱层析和透析浓缩得到的，其为由α‑D‑半乳糖和β‑D‑葡萄糖组成的杂多糖，其中α‑D‑半乳糖和β‑D‑葡萄糖的残基的摩尔比为5:1。该多糖具有显著的免疫调节活性，且对多种肿瘤细胞具有显著的抑制活性。

技术领域

本发明属于真菌多糖应用技术领域，具体地说，涉及一种美网柄牛肝菌多糖及其制备方法和应用。

背景技术

多糖(polysaccharide)是由10个以上单糖通过糖苷键连接起来的天然生物大分子。目前，研究已发现多糖具有多种生理作用，如免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、抗氧化、降血糖等。而且，二维核磁共振谱(¹H-¹H NMR、HSQC、HMBC等)、气相色谱-质谱联用(GC-MS)、高效液相色谱(HLPC)、X光衍射和扫描电子显微镜等技术的快速发展，在很大程度上促进了多糖结构的研究。

美网柄牛肝菌(Boletus reticulates Schaeff.)属于伞菌目、牛肝菌科、牛肝菌属，可食用而且味道鲜美。美网柄牛肝菌的子实体呈中等至大型，菌盖厚呈半球形或扁半球形，后期渐呈扁平。菌肉白色，后呈乳白色，表皮下稍有褐色，伤痕处稍变褐色，干燥有愉快的香气。菌管白色或污白色带黄色，后期管孔带青褐绿色。菌柄粗壮，近梭形或棒状圆柱形。目前，有关美网柄牛肝菌子实体多糖的精细结构、免疫活性和抗肿瘤活性还未见报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种美网柄牛肝菌多糖及其制备方法和应用。

其具体技术方案为：

本发明提供一种美网柄牛肝菌多糖，其为由α-D-半乳糖和β-D-葡萄糖组成的杂多糖，其中α-D-半乳糖和β-D-葡萄糖的残基的摩尔比为5:1。

进一步地，该多糖的重均分子量为100000-200000Da(如100000、120000、150000、160000、180000、200000Da)；在本发明的一个实施例中，该多糖的重均分子量为150935Da。

进一步地，该多糖的化学结构中包含1,6-连接的α-D-半乳糖残基和4-连接的β-D-葡萄糖残基。

再进一步地，该多糖的化学结构中包含由1,6-连接的α-D-半乳糖残基组成的主链和由4-连接的β-D-葡萄糖残基组成的侧链。

在本发明的一个实施例中，该多糖具有如下结构式：

其中，n为90-180的整数(如90、110、140、150、167、180)。

上述多糖是自美网柄牛肝菌子实体依次通过水提醇沉、除蛋白、离子交换柱层析和透析浓缩得到的。

本发明还提供一种上述美网柄牛肝菌多糖的制备方法，其包括如下步骤：

(1)取美网柄牛肝菌子实体粉末，热水浸提，所得水提物依次经浓缩、醇沉、除蛋白得到粗多糖；

(2)将步骤(1)所得粗多糖通过离子交换柱层析，洗脱，收集洗脱液；

(3)将步骤(2)所得洗脱液用透析袋进行透析浓缩。

优选地，(4)将步骤(3)完成后的透析袋内液体离心，取上清液，冷冻干燥。

进一步地，热水浸提步骤中，浸提温度为80-100℃(如80、85、90、95、100℃)，在本发明的一个实施例中，该浸提温度为100℃。

进一步地，热水浸提步骤中，水与美网柄牛肝菌子实体粉末的液料比为1-10:1(体积质量比，如1:1、2:1、3:1、5:1、6:1、8:1、10:1，mL/g)；在本发明的一个实施例中，该液料比为3:1。