[发明专利]一种同时测定DON及多种DON生物转化产物的方法

说明书

本发明公开了一种同时测定DON及多种DON生物转化产物的方法，包括如下步骤：(1)对待测样品进行预处理；(2)通过Q Exactive^TM组合型四极杆Orbitrap质谱仪测定预处理后的样品中DON及DON生物转化产物的含量。本发明的样品前处理简单，通过一次提取可将样品中的DON及多种DON生物转化产物最大限度的提取出来；采用本发明的方法可以快速、准确的对DON及八种DON生物转化产物同时进行测定。

技术领域

本发明涉及药物分析技术领域，具体涉及一种同时测定DON及多种DON生物转化产物的方法。

背景技术

禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)是引起小麦赤霉病的主要病原体，经常在田间生长或贮藏期间感染小麦等谷物。感病后的小麦籽粒会携带多种毒素，其中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)，亦称呕吐毒素，在人类和动物饮食中经常出现，严重影响食品安全与人畜健康。

DON毒素是一种倍半烯衍生物，化学分子式C₁₅H₂₀O₆，是世界上最常见的谷物污染物之一，属于B型单端孢霉烯族真菌毒素的一种。DON食物中毒对人类的急性影响包括腹痛，头晕，头痛，咽喉刺激，恶心，呕吐，腹泻和血便。

近年来研究发现，在赤霉病污染的谷物中除了游离态DON外，还存在结合态DON。结合态DON是作物在受到赤霉病菌侵染时，为降低DON在作物中的积累、抵御赤霉病扩展代谢产生的，又称DON生物转化产物。DON生物转化产物主要包括：3-ADON、DON-3-G、DON-15-G、DON-3-Sulfate、DON-13-NAC、DON-10-GSH、DON-S-Cys-Gly、DON-S-Cys等。在谷物加工及其制品的生产过程中，DON生物转化产物和DON一样可以留存在食品及饲料中。由于常规的毒素分析中难以被检测，DON生物转化产物又称为隐蔽型DON。动物饲喂试验表明，DON生物转化产物可以在哺乳动物肠道内重新转化为游离态的DON，并进而表现出DON的毒性。因此，建立DON生物转化产物的定量检测方法，对于准确评价谷物中真菌毒素的含量水平具有重要意义。

目前关于检测谷物及食品中DON及DON生物转化产物的报道主要有：《Journal ofagricultural and food chemistry》，2012，46，11638和《Mycotoxinresearch》，2012，28，181通过多功能MycoSep226或225柱净化后液相串联质谱法测定谷物、玉米及其产品中DON、D3G、3ADON及15ADON的含量。此类方法前处理操作繁琐且成本较高，而且对D3G回收率偏低(50％-60％)；《Food additives and contaminants：Part A》，2009，26，507样本提取后未净化直接液相串联质谱法测定小麦和玉米中DON及D3G含量。此方法虽然前处理简单快捷，但是样品中含有的脂类等干扰物质严重减低检测灵敏度，而且长期使用对质谱离子源造成极大损坏。

发明内容

针对上述现有技术，本发明的目的是提供一种同时测定DON及多种DON生物转化产物的方法。本发明的样品前处理简单，通过一次提取可将样品中的DON及多种DON生物转化产物最大限度的提取出来；采用本发明的方法可以快速、准确的对DON及八种DON生物转化产物同时进行测定。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种同时测定DON及多种DON生物转化产物的方法，包括如下步骤：

(1)对待测样品进行预处理；

(2)通过Q Exactive^TM组合型四极杆Orbitrap质谱仪测定预处理后的样品中DON及DON生物转化产物的含量；