[发明专利]表达抗新城疫病毒融合蛋白的细胞系及其构建方法和应用在审
| 申请号： | 201910543875.9 | 申请日： | 2019-06-21 |
| 公开（公告）号： | CN110257339A | 公开（公告）日： | 2019-09-20 |
| 发明（设计）人： | 赵钦;孙亚妮;侯高鹏;周恩民 | 申请（专利权）人： | 西北农林科技大学 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/867;C07K19/00;C12N9/08;G01N33/68 |
| 代理公司： | 北京东方盛凡知识产权代理事务所(普通合伙) 11562 | 代理人： | 宋平 |
| 地址： | 712100 陕*** | 国省代码： | 陕西;61 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 构建 新城疫病毒 融合蛋白 纳米抗体 新城疫抗体 保藏 鸡血清 检测 应用 中国典型培养物 慢病毒载体 细胞系表达 细胞系培养 融合基因 外源基因 稳定表达 血清检测 直接检测 上清液 细胞株 稀释 效价 转入 携带 感染 成功 | ||
1.一种表达抗新城疫病毒NP蛋白纳米抗体－HRP融合蛋白的细胞系，其特征在于，所述细胞系在中国典型培养物保藏中心的保藏号为C201981；保藏单位地址：湖北武汉，武汉大学。
2.一种如权利要求1所述的表达抗新城疫病毒NP蛋白纳米抗体－HRP融合蛋白的细胞系的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：
a：合成编码抗新城疫病毒NP蛋白纳米抗体与HRP融合基因：将编码新城疫病毒NP蛋白纳米抗体和HRP的核苷酸序列直接融合，中间用柔性序列连接，合成重组融合基因；
b：构建用于表达所述重组融合基因的重组慢病毒载体：将所述重组融合基因经酶切后，连接到慢病毒载体上，得到重组慢病毒载体；其中，慢病毒载体为PLVX-IRES-ZsGreen1；
c：重组慢病毒载体的包装：将所述重组慢病毒载体及2个辅助质粒转染至培养的HEK-293T细胞中，传代培养，筛选获得表达抗新城疫病毒NP蛋白纳米抗体与HRP融合蛋白的细胞系。
3.如权利要求2所述的表达抗新城疫病毒NP蛋白纳米抗体－HRP融合蛋白的细胞系的构建方法，其特征在于，所述新城疫病毒NP蛋白纳米抗体的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述HRP的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。
4.如权利要求2所述的表达抗新城疫病毒NP蛋白纳米抗体－HRP融合蛋白的细胞系，其特征在于，所述辅助质粒为psPAX2和pMD2.G。
5.一种表达抗新城疫病毒NP蛋白纳米抗体－HRP融合蛋白的细胞系是由权利要求2-4任意一项所述的构建方法构建。
6.一种抗新城疫病毒NP蛋白纳米抗体－HRP融合蛋白由权利要求1或5所述细胞系分泌表达。
7.一种如权利要求6所述的抗新城疫病毒NP蛋白纳米抗体－HRP融合蛋白在鸡血清中抗新城疫病毒抗体检测中的应用。
8.一种如权利要求6所述的抗新城疫病毒NP蛋白纳米抗体－HRP融合蛋白在新城疫抗体阳性鸡血清检测中的应用。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于西北农林科技大学，未经西北农林科技大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201910543875.9/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
