[发明专利]一种抑制人恶性脑胶质瘤的靶向linc00998基因的抑制剂及其应用

说明书

一种抑制人恶性脑胶质瘤的靶向linc00998基因的抑制剂及其应用。本发明属于生物基因治疗领域，具体涉及一种抑制脑胶质瘤的靶向linc00998基因的抑制剂及其应用。该靶向抑制剂的核苷酸序列为：5’‑TGTACGAACTCGTCTCCAA‑3’（SEQ ID No.1）。本发明为了解决抑制脑胶质瘤的增殖迁移侵袭基因治疗问题，以RNAi技术为基础，通过人工合成linc00998靶向shRNA，可以靶向作用于linc00998基因，促进其降解，达到使linc00998基因表达降低的结果，为临床上治疗脑胶质瘤提供了新的思路。

技术领域

本发明属于生物基因治疗领域，具体而言，涉及一种抑制人恶性脑胶质瘤的靶向linc00998基因的抑制剂及其应用。

背景技术

脑胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发性恶性肿瘤，约占所有颅内原发肿瘤的45％。尽管随着目前针对脑胶质瘤的治疗方式较多，包括手术治疗、放疗、化疗、基因治疗，生物治疗、中医中药、免疫治疗等多种治疗手段，但脑胶质瘤患者的预后仍然不佳。近20年来，脑胶质瘤的发病率逐渐升高，但患者预后却没有明显改善。据统计，间变型脑胶质瘤经传统手术及术后辅助标准放化疗的中位生存期仅2-5年，而胶质母细胞瘤(glioblastoma，GBM)的中位生存期仅12-14个月。(Wen P Y,et al.Malignant gliomas in adults[J].TheNew England journal of medicine,2008,359(5):492-507.)脑胶质瘤细胞具有增殖活跃，迁移侵袭能力强，与周围正常组织界限不清，手术常常难以完全切除，瘤细胞残留导致术后极易复发，因此如何抑制脑胶质瘤细胞的增殖、迁移及侵袭能力对提高脑胶质瘤的治疗效果具有重要的理论意义和现实意义。

长链非编码RNA(long non-coding RNA，lncRNA)是一类转录本长度超过200nt的不编码蛋白质的RNA分子。在基因水平，转录水平，转录后水平，翻译水平，翻译后水平等多个层面，lncRNA通过介导信号转导、作为分子阻断剂、与蛋白结合、提供中心平台等方式来发挥分子功能，并与肿瘤的发生、发展密切相关。如：文献报道长链非编码RNA OIP5-AS1在脑胶质瘤组织和细胞中表达上调，并可通过发挥竞争性内源性RNA作用与CEBPA竞争性结合miR-367-3p影响脑胶质瘤细胞的增殖，迁移侵袭等恶性生物学行为。(Xiaobai Liu,etal.PIWIL3/OIP5-AS1/miR-367-3p/CEBPA feedback loop regulates the biologicalbehavior of glioma cells[J].Theranostics,2018,8(4):1084-1105)linc00998位于7q31.1，有研究表明，linc00998在重度抑郁症患者中表达下调。(Ye N et al.Intergenicvariants may predispose to major depression disorder through regulation oflong non-coding RNA expression[J].Gene,2017,601:21-26.)但经文献检索，关于linc00998在脑胶质瘤中发挥的作用尚无报道。

RNA干扰(RNAinterference，RNAi)技术主要是通过与Dicer酶形成RNA沉默复合体，靶向结合目的分子进而使其降解的分子过程。小发夹RNA(short hairpin RNA，shRNA)是一种具有茎环结构的RNA分子，在哺乳动物细胞内shRNA可被剪切形成小干扰RNA，靶向结合目的基因，导致靶基因沉默。

本发明旨在利用RNAi技术研制linc00998基因的抑制剂，为抑制脑胶质瘤细胞增殖，迁移及侵袭寻找新的分子作用靶点，在脑胶质瘤基因治疗领域发挥作用。

发明内容

本发明的目的是为解决脑胶质瘤细胞增殖、迁移及侵袭活跃问题，以RNAi技术为基础，通过人工合成linc00998靶向shRNA,可以靶向作用于linc00998基因,并促进其降解，使linc00998的表达降低，从而发挥抑制人脑胶质瘤的细胞增殖、迁移和侵袭能力。