[发明专利]一种多重定量检测EB病毒和巨细胞病毒的试剂盒

权利要求书

1.一种多重定量检测EB病毒和巨细胞病毒的试剂盒，其特征在于，包括PCR反应液、PCR反应酶系、定量标准品、阳性质控品以及阴性质控品，所述PCR反应液包括PCR缓冲液、EB病毒和巨细胞病毒特异性的正、反向引物、EB病毒和巨细胞病毒特异性荧光探针，其中，

所述EB病毒特异性正向引物的核苷酸序列为：5’GTTTGAAGGATGCGATTAAGGAC-3’，所述EB病毒特异性反向引物的核苷酸序列为：5’GGCAAATCTACTCCATCGTCAA-3’；

所述巨细胞病毒特异性正向引物的核苷酸序列为：5’ACGGGCGGTTTAATAATCACC-3’，所述巨细胞病毒特异性反向引物的核苷酸序列为：5’GTCGCGGTTACTAACACTCCT-3’；

所述EB病毒特异性荧光探针的核苷酸序列为：5’ATGCCAAAGCCCGCTCCTACCTG-3’；

所述巨细胞病毒特异性荧光探针的核苷酸序列为：5’CTACTCCCGAGCTCAGCCCGCGTA-3’。

2.根据权利要求1所述的一种多重定量检测EB病毒和巨细胞病毒的试剂盒，其特征在于：所述定量标准品由定量参考品1、定量参考品2、定量参考品3、定量参考品4和定量参考品5组成，其浓度分别为2ⅹ107copies/mL、2ⅹ106copies/mL、2ⅹ105copies/mL、2ⅹ104copies/mL、2ⅹ103copies/mL。

3.根据权利要求2所述的一种多重定量检测EB病毒和巨细胞病毒的试剂盒，其特征在于：所述定量参考品1、定量参考品2、定量参考品3、定量参考品4和定量参考品5均由含EB病毒和巨细胞病毒序列的DNA组成，其序列为：

TCACGATACAGCCGGCGGTATCGATAATCTTGTTGCGGTACTGGATGGTAAAGTCGGGCTCGGGCTTGATGTCTTCCTGTTTGATGAGGGGCAGCATGATAGGCGCGGGAGGCACGGGCGGTTTAATAATCACCTTGAAAGGACGCGTGGTTTTGCGCGGTTTCTTACGCGGGCTGAGCTCGGGAGTAGCGGATGCCCCGGGGAGAGGAGTGTTAGTAACCGCGACGCTGGTGGGGGTCGGCTTGTTAAGAGGGGCGCTGCTAACGCTGCAAGAGTGGGTTGTCAGCGTGGGGCCGGTGCTACTGGAATCGATACCGGCATGATTGACAGCCTGGGCGAGGATGTCACCTGATGGTGATAAGAAGACACGGGAGACTTAGTACGGTTTCACAGGCGTGACACGTTTATTGAGTAGGATTACAGAGTATAACATAGAGTATAATATAGAGTATACAATAGTGACGTGGGATCCATAACAGTAACTGATATATATATTTTTACAAACTCATATATTTGCTGAGGGTTTGAAGGATGCGATTAAGGACCTTGTTATGCCAAAGCCCGCTCCTACCTGCAATATCAAGGCGACTGTGTGCAGCTTTGACGATGGAGTAGATTTGCCTCCCTGGTTTCCACCTATGGTGGAAGGGGCTGCCGCGGAGGGTGATGACGGAGATGACGGAGATGACGGAGATGAAGG。

4.根据权利要求1所述的一种多重定量检测EB病毒和巨细胞病毒的试剂盒，其特征在于：所述PCR缓冲液由50mmol/L Tris-HCl、3～8mmol/L MgCl2和150～350mmol/L KCl组成。

5.根据权利要求1所述的一种多重定量检测EB病毒和巨细胞病毒的试剂盒，其特征在于：所述PCR反应酶系由UDG酶、热启动Taq酶、dUTPs组成，每人份PCR反应酶系中UDG酶的用量为1～3U；热启动Taq酶的用量为2～5U；dNTPs为6～12mmol。

6.根据权利要求1所述的一种多重定量检测EB病毒和巨细胞病毒的试剂盒，其特征在于：所述EB病毒特异性荧光探针的5’标记有VIC荧光基团，3’标记有淬灭基团BHQ1。