[发明专利]一种用于二十八烷醇预防肝损伤效果的体外评价方法

权利要求书

1.一种用于二十八烷醇预防肝损伤效果的体外评价方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）用导致肝损伤的药液孵育人正常肝细胞，得到第一孵育肝细胞，测定第一孵育肝细胞的存活率和凋亡率；

（2）用二十八烷醇溶液和导致肝损伤的药液共同孵育人正常肝细胞，得到第二孵育肝细胞，测定第二孵育肝细胞的存活率和凋亡率；

（3）用步骤（2）所述第二孵育肝细胞的存活率减去步骤（1）所述第一孵育肝细胞的存活率，得到第一差值；

（4）用步骤（1）所述第一孵育肝细胞的凋亡率减去步骤（2）所述第二孵育肝细胞的凋亡率，得到第二差值；

当所述第一差值≥10%或第二差值≥10%时，二十八烷醇对肝损伤具有预防效果；

所述二十八烷醇溶液的浓度为50~200ug/mL；

所述导致肝损伤的药液的浓度为8~20mmol/L；

所述第一孵育肝细胞中的人正常肝细胞的种类、数量、孵育的条件与第二孵育肝细胞中人正常肝细胞相同；

所述步骤（3）和（4）之间无时间顺序限定；

所述导致肝损伤的药液为对乙酰氨基酚；

所述二十八烷醇从动植物蜡质中提取得到；所述动植物蜡质的来源为糠蜡、蔗蜡、蜂蜡和虫蜡中的一种或几种；

所述二十八烷醇的制备方法为：

将无水乙醇、航空煤油、氢氧化钠与动植物蜡质混合后进行加热回流提取，得到提取液；将所述提取液进行过滤后，取上清液冷却、抽滤后，得到滤饼；将所述滤饼脱溶、烘干，得到二十八烷醇粗品；将所述二十八烷醇粗品进行精馏，收集二十八烷醇。

2.根据权利要求1所述的评价方法，其特征在于，所述人正常肝细胞的数量为1×10⁵~1×10⁶个/mL。

3.根据权利要求2所述的评价方法，其特征在于，所述人正常肝细胞包括HL-7702细胞。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤（2）中二十八烷醇溶液和导致肝损伤的药液的体积比为(0.8~1.2):(0.8~1.2)。

5.根据权利要求1所述的评价方法，其特征在于，所述孵育的时间为24~72h。

6.根据权利要求1所述的评价方法，其特征在于，所述肝损伤为药物性肝损伤。