[发明专利]一种骆驼乳清辅助降血糖活性蛋白及其在降血糖中的应用

说明书

本发明公开一种骆驼乳清辅助降血糖活性蛋白及其在降血糖中的应用，以新疆双峰驼乳清蛋白为研究对象，通过分离获得降糖活性组分CWP8，经LC‑MS/MS鉴定，包括乳铁蛋白、乳清白蛋白、补体因子B、丝氨酸蛋白酶抑制剂A3‑8、Fe‑家族3短形蛋白、多聚免疫球蛋白受体、热休克同源蛋白、膜突蛋白、乳过氧化物酶亚型1前体蛋白、葡萄糖调节蛋白、乳过氧化物酶、巯基氧化酶等，降糖活性组分CWP8可明显增加胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖摄取量，减少脂质生成，增加胰岛素抵抗HepG2细胞的敏感性。为从天然产物中寻求高效、低毒的新型降糖物质、开发辅助降糖的功能性食品、保健食品或特医食品提供实验基础和理论依据。

技术领域

本发明涉及乳清蛋白的技术领域，具体地说，本发明涉及一种骆驼乳清辅助降血糖活性蛋白及其在降血糖中的应用的技术领域。

背景技术

骆驼乳是含营养物质非常丰富的一种食物，不仅富含蛋白质，脂肪，乳糖等营养物质，钙，磷，钾等矿物质。骆驼乳清蛋白(CWP) 被认为是一种强大的天然抗氧化剂，CWP占骆驼奶总蛋白的20-25％。 CWP含有乳铁蛋白(LF)、乳蛋白、乳球蛋白、乳糖过氧化物酶、溶菌酶等多种成分，富含免疫球蛋白，它可减少氧化应激，增强免疫系统功能，增加谷胱甘肽水平，CWP在疾病治疗和营养干预中的有益作用包括刺激先天免疫和适应性免疫以及抗炎、抗癌、抗菌和抗病毒活性等。根据流行病学调查结果表明，长期食用驼乳的地区，糖尿病发病率较低，糖尿病病人跟踪调查发现驼乳具有辅助降血糖的功效，并且在辅助治疗糖尿病及其并发症如高胆固醇水平、肝肾疾病、降低氧化应激和延迟伤口愈合具有安全性和有效性。双峰驼乳作为一种新型特种乳资源，具有丰富的营养价值及治疗多种疾病的潜力。目前对双峰驼乳的功效研究研究等方面，国内仅有新疆、内蒙古、甘肃有相关研究报道；国外对单峰驼研究较多，在沙特阿拉伯、阿联酋、伊朗、埃及等东亚和北非地区，骆驼乳被用于增强免疫力，辅助治疗艾滋病、冠心病、降血糖等方面。因此，对骆驼乳清蛋白降糖活性成分分析具有一定的研究意义和开发价值。

发明内容

本发明提供一种骆驼乳清辅助降血糖活性蛋白及其在降血糖中的应用，以新疆双峰驼乳清蛋白为研究对象，通过分离获得降糖活性组分CWP8，经LC-MS/MS鉴定，包括葡萄糖调节蛋白78(Glucos e-regulated protein 78)、乳铁蛋白(Lactoferrin)、脂肪酸结合酶(F atty acid synthase)、乳过氧化物酶(Lactoperoxidase)、热休克同源蛋白(Heatshock cognate protein)、膜突蛋白(Moesin)、乳过氧化物酶亚型1前体蛋白(Proteindisulfide-isomerase)、非特异性脂质转运蛋白(Non-specific lipid-transferprotein)、超氧化物歧化酶(Cu-Zn)、糖基化依赖性细胞粘附分子1(Glycosylation-depende nt cell adhesion molecule 1)等。具有较好的降糖降脂活性，降糖活性组分CWP8处理HepG2细胞后增加细胞对葡萄糖的摄取量，可减少胰岛素抵抗HepG2细胞脂质生成，可增加胰岛素抵抗HepG2细胞的敏感性；降糖活性组分CWP8对于寻找新的降糖治疗预防手段有一定价值，为从天然产物中寻求高效、低毒的新型降糖物质提供理论基础，进而为开发降糖临床辅助治疗保健品、功能性骆驼乳产品以及骆驼乳产业长远发展提供实验基础和理论依据。

本发明提供的一种降糖活性组分CWP8，通过如下步骤的方法制得：

(1)驼乳样品过滤除杂，脱脂，收集脱脂乳，调节pH至4.4-4.8，于30-80℃水浴加热10-45min或放置过夜后，离心去除沉淀，收集上清液得到骆骆驼乳清；盐析法采用80％-100％饱和度的硫酸铵进行沉淀，4℃静置3小时后离心收集降糖活性组分CWP8，经透析，浓缩后-70℃冷冻过夜，冷冻干燥后-20℃储存备用。