[发明专利]血管母细胞瘤分型诊断试剂盒在审
| 申请号： | 201910342086.9 | 申请日： | 2019-04-26 |
| 公开（公告）号： | CN110066874A | 公开（公告）日： | 2019-07-30 |
| 发明（设计）人： | 马德选;王莹 | 申请（专利权）人： | 复旦大学附属华山医院 |
| 主分类号： | C12Q1/6886 | 分类号： | C12Q1/6886;C12N15/11 |
| 代理公司： | 上海德昭知识产权代理有限公司 31204 | 代理人： | 郁旦蓉 |
| 地址： | 200040 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 血管母细胞瘤 诊断试剂 亚型 引物 分型诊断 基因印记 试剂盒 复发 第二引物 第三引物 第四引物 基因突变 跟踪 检测 | ||
1.一种血管母细胞瘤分型诊断试剂盒，其特征在于，包括：
基因印记亚型血管母细胞瘤诊断试剂、血管母细胞瘤复发跟踪诊断试剂以及基因突变亚型血管母细胞瘤诊断试剂，
其中，所述基因印记亚型血管母细胞瘤诊断试剂包括用于在甲基化特异性PCR中对VHL启动子进行扩增的第一引物组，该第一引物组包括第一引物、第二引物、第三引物以及第四引物，
所述第一引物的序列如SEQ NO:1和SEQ NO:2所示，
所述第二引物的序列如SEQ NO:3和SEQ NO:4所示，
所述第三引物的序列如SEQ NO:5和SEQ NO:6所示，
所述第四引物的序列如SEQ NO:7和SEQ NO:8所示，
所述血管母细胞瘤复发跟踪诊断试剂包括用于检测血管母细胞瘤复发标记物microRNA-365的第五引物，以及用于检测血管母细胞瘤复发标记物microRNA-517的第六引物，
所述第五引物的的序列如SEQ NO:9所示，
所述第六引物的的序列如SEQ NO:10所示。
2.根据权利要求1所述的血管母细胞瘤分型诊断试剂盒，其特征在于：
其中，所述基因突变亚型血管母细胞瘤诊断试剂包括用于对VHL基因的进行扩增的第二引物组，该第二引物组包括第七引物、第八引物以及第九引物，
所述所述第七引物的序列如SEQ NO:13和SEQ NO:14所示，
所述第八引物的序列如SEQ NO:15和SEQ NO:16所示，
所述第九引物的序列如SEQ NO:17和SEQ NO:18所示。
3.根据权利要求1所述的血管母细胞瘤分型诊断试剂盒，其特征在于：
其中，所述microRNA-365的序列如SEQ NO:11所示，
所述microRNA-517的序列如SEQ NO:12所示。
4.根据权利要求1所述的血管母细胞瘤分型诊断试剂盒，其特征在于，还包括：
mosaic亚型血管母细胞瘤诊断试剂，包括用于对VHL基因的进行扩增的第三引物组，该第三引物组包括第十引物、第十一引物以及第十二引物，
所述第十引物的序列如SEQ NO:19和SEQ NO:20所示，
所述第十一引物的序列如SEQ NO:21和SEQ NO:22所示，
所述第十二引物的序列如SEQ NO:23和SEQ NO:24所示。
5.根据权利要求1所述的血管母细胞瘤分型诊断试剂盒，其特征在于，还包括：
用于提取基因组DNA的试剂、用于对基因组DNA进行亚硫酸氢盐处理的试剂、用于提取RNA的试剂以及用于进行PCR的试剂。
6.根据权利要求5所述的血管母细胞瘤分型诊断试剂盒，其特征在于：
其中，用于进行PCR的试剂包括PCR缓冲液、dNTPs、Taq DNA聚合酶、逆转录酶、RNase抑制剂、无核酸酶水以及PCR Master Mix。
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