[发明专利]一种同时检测血清中13种甾体激素的方法

说明书

本发明提供了一种同时检测血清中13种甾体激素的方法，包括：将待测血清样品与内标溶液混合，通过液‑液萃取得到检测液，采用超高效液相色谱‑串联质谱进行检测；液相色谱条件：流动相A为0.1％甲酸水溶液，流动相B为0.1％甲酸甲醇溶液；质谱条件：正离子模式，多反应监测的质谱扫描模式；该13种甾体激素为孕烯醇酮、孕酮、17‑羟孕烯醇酮、17α‑羟孕酮，11α‑羟孕酮、21‑脱氧皮质醇、11‑脱氧皮质酮、皮质酮、氢化可的松、11‑脱氧皮质醇、可的松、醛固酮和雌酮。该方法同时检测13种甾体激素的检测时间仅6分钟，操作简便，耗时少；灵敏度高，准确性好，特异性强，检测范围广，在医疗和生化检测领域应用前景广阔。

技术领域

本发明涉及医疗分析检测技术领域，更具体地，涉及一种同时检测血清中13种甾体激素的方法。

背景技术

内分泌系统直接控制着人类重要的生理过程，如生长、发育、生殖和代谢。甾体激素类药物是内分泌系统中一个大家族，具体指分子结构中含有甾体结构的激素类药物，也是临床上一类重要的药物，主要包括肾上腺皮质激素和性激素两大类。甾体激素由胆固醇主干合成，经各种酶转化为不同种类的类固醇，他们都是一类四环脂肪烃化合物，具有环戊烷多氢菲母核，通常在羰基和羟基官能团的数量和位置上结构的细微变化，这些差别导致他们生理功能的巨大差异。甾在维持生命、调节性功能，调节身体代谢等方面起着重要作用。

其中孕激素主要为孕烯醇酮、孕酮(黄体酮)、17-羟孕烯醇酮、17α-羟孕酮和11α-羟孕酮。皮质激素主要为皮质酮、氢化可的松、可的松、11-脱氧皮质醇、11-脱氧皮质酮、21-脱氧皮质醇和醛固酮，雌酮为雌激素。

以上13种甾体激素的信息表如下表1所示：

表1 13种甾体激素信息表

其中，孕烯醇酮(Pregnenolone)是位于甾体激素合成通路的上游，是合成其他甾体激素的前体。孕烯醇酮与其下游的神经甾体一同被称为第四代神经递质，具有促进胆碱能神经元功能、促进微管聚合、调节突触可塑性及调节神经细胞钙稳态、抗自由基损伤、促进认知功能等多重功效，在调解神经系统功能方面具有广泛而显著的效果。

黄体酮(progesterone)又称孕酮是由卵巢黄体分泌的一种天然孕激素，在体内对雌激素激发过的子宫内膜有显著形态学影响，为维持妊娠所必需激素。黄体酮浓度在辅助诊断异位妊娠中具有重要的意义，其值还被广泛应用于先兆流产、习惯性流产、无排卵型闭经和更年期综合症等疾病的诊断。

17α-羟孕酮(17-α-hydroxyprogesterone，17-OHP)是先天性肾上腺皮质增生症诊断的重要依据，当体内21-羟化酶缺陷时皮质醇(氢化可的松)和皮质酮形成完全或部分受阻,低水平的皮质醇经负反馈作用促进下丘脑-垂体-肾上腺轴的促肾上腺皮质激素(ACTH)分泌增加，酶阻断的前置化合物17-OHP积聚，因此17-OHP含量检测是生化检测中一个重要的指标。

17-羟孕烯醇酮(17-hydroxypregnenolone)和11α-羟孕酮(11α-hydroxyprogesterone)都是甾类化合物中间体，前者在体内一般由孕烯酮醇在P45c17酶的作用下转化而来，在3β-羟基类固醇脱氢酶的作用下又可转化为17α-羟孕酮。

皮质酮(Corticosterone)是一种皮质激素类二十一碳甾体激素，由肾上腺的皮质产生出来。临床上出现皮质醇增多症(库欣病)、肾上腺肿瘤、心肌梗死等疾病时其含量会增多，当肾上腺皮质功能低下，如发生艾迪生病、席汉症等疾病时，其含量减少。因此在临床上该激素是重要的临床疾病诊断指标。