[发明专利]一种悬浮式液态生物芯片检测方法在审
| 申请号: | 201910329326.1 | 申请日: | 2019-04-23 |
| 公开(公告)号: | CN110554178A | 公开(公告)日: | 2019-12-10 |
| 发明(设计)人: | 方剑秋;钟春梅 | 申请(专利权)人: | 杭州深度生物科技有限公司 |
| 主分类号: | G01N33/53 | 分类号: | G01N33/53;G01N33/58;G01N21/64 |
| 代理公司: | 31220 上海旭诚知识产权代理有限公司 | 代理人: | 郑立 |
| 地址: | 311121 浙江省杭*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 信息编码 荧光微球 激光器 纳米晶 液态生物芯片 荧光检测信号 单细胞悬液 标记荧光 采集通道 检测通道 结果计算 抗体标记 微球粒径 样本采集 检测仪 系统质 悬浮式 检测 波长 激发 荧光 单光 三色 制备 分类 配置 | ||
1.一种悬浮式液态生物芯片检测方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤一:样本采集;
步骤二:单细胞悬液制备;
步骤三:纳米晶荧光微球抗体标记;
步骤四:采用单个激光器激发所述纳米晶荧光微球的分类荧光和待测分子的标记荧光,检测仪配置为单光三色;
步骤五:通过多个采集通道获得荧光检测信号;
步骤六:结果计算;
步骤七,系统质控。
2.如权利要求1所述的一种悬浮式液态生物芯片检测方法,其特征在于,步骤二中,所述单细胞悬液制备方法包括:酶消化法和/或机械法和/或化学试剂处理法。
3.如权利要求1所述的一种悬浮式液态生物芯片检测方法,其特征在于,所述采集通道包括FSC,SSC,FL1(FITC),FL2(PE)及FL3(Percp)。
4.如权利要求3所述的一种悬浮式液态生物芯片检测方法,其特征在于,所述FL1(FITC)及所述FL3(Percp)两个采集通道用于区分不同荧光编码的微球。
5.如权利要求3所述的一种悬浮式液态生物芯片检测方法,其特征在于,所述FL2(PE)采集通道对应不同编码微球的检测项目。
6.如权利要求1所述的一种悬浮式液态生物芯片检测方法,其特征在于,步骤六包括如下步骤:a、选择FSC通道峰值数据;b、形成编码纳米晶荧光微球FITC-Percp散点图;c、根据每一种纳米晶荧光微球区域获取有效数据;d、计算每一种纳米晶荧光微球例子分布图并选择对应PE通道峰值数据;e、通过标准曲线查找荧光强度对应的浓度结果。
7.如权利要求6所述的一种悬浮式液态生物芯片检测方法,其特征在于,步骤b中,在程序使用前,需要配置每种编码微球的有效数据区域。
8.如权利要求6所述的一种悬浮式液态生物芯片检测方法,其特征在于,步骤c中,针对不同的待测项目,只使用对应有效数据区域内的数据进行计算,根据范围内数据的密度分布,获取编码微球粒子团的分布图。
9.如权利要求6所述的一种悬浮式液态生物芯片检测方法,其特征在于,步骤d中,对每一个编码微球的粒子团,选择对应PE-A通道的数据,计算结果数据的中值,就得到检测项目的荧光强度。
10.如权利要求1所述的一种悬浮式液态生物芯片检测方法,系统质控包括如下步骤:1)、获取或设置初始电压;2)、开始测量;3)、循环接收数据;4)、分析数据,如果粒子团中值在范围内,则保存数据,计算粒子团中值及CV,保存结果显示及打印,如果粒子团中值不在范围内,则丢弃数据,重新计算电压,调整电压后进入步骤3)并继续循环。
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