[发明专利]一种同时测定制狗脊饮片中5种成分含量的HPLC方法

权利要求书

1.一种同时测定制狗脊饮片中5种成分含量的方法，所述五种成分分别为曲酸、5-HMF、原儿茶酸、麦芽酚和原儿茶醛；所述方法为高效液相法，

其中，色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇为流动相A，甲酸-甲酸铵溶液为流动相B，梯度洗脱，0～33min时，流动相A占总流动相4％；33～45min，流动相A占比由4％升高到95％，45～70min时，流动相A占比回到4％；流速0.8-1.0mL·min^-1；柱温35℃，理论板数不低于2000；曲酸、原儿茶酸、麦芽酚及原儿茶醛的检测波长为280nm、5-HMF的检测波长为260nm；进样量5-20μL。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相B为甲酸-甲酸铵溶液，其由甲酸和甲酸铵溶解于水中配制得到，其中，甲酸的浓度为0.1％，0.1％为100ml溶剂中含有0.1g甲酸，甲酸铵的浓度为0.1-0.3％，0.1％-0.3％为100ml溶剂中含有0.1g-0.3g甲酸铵。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述流动相B为0.1％的甲酸-0.1％甲酸铵溶液。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法中配制对照品溶液时以甲醇-1％冰醋酸为溶剂，其中甲醇与1％冰醋酸的体积比为70：30。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述对照品溶液的制备包括：取曲酸、5-HMF、原儿茶酸、麦芽酚及原儿茶醛对照品各适量，精密称定，加甲醇-1％冰醋酸溶液配制成浓度分别为103.9、964.0、504.4、104.9及105.8μg·mL^-1的混合对照品储备液，精密吸取上述储备液5mL，置于100mL容量瓶中，加甲醇-1％冰醋酸溶液稀释至刻度，摇匀，即得含曲酸、5-HMF、原儿茶酸、麦芽酚及原儿茶醛分别为5.20、48.20、25.22、5.24及5.29μg·mL^-1的混合对照品溶液；所述甲醇-1％冰醋酸溶液配比为70：30。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法中配制供试品溶液时以水为溶剂。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备包括：精密称取制狗脊饮片细粉适量，精密加入水适量，密塞，称定重量；超声，超声过程中不时振摇，超声后放冷，用水补足失重，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，其中超声时间为2-5h，超声功率为250W，超声频率为40kHz。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述供试品溶液的制备包括：精密称取制狗脊饮片细粉约2g，精密加入水25mL，密塞，称定重量；超声2h，超声过程中不时振摇；超声后放冷，用水补足失重，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。

10.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法包括测定时分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5-20μL，注入液相色谱仪，测定，即得。

11.根据权利要求10所述的方法，其特征在于，所述方法包括测定时分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μL，注入液相色谱仪，测定，即得。

12.根据权利要求1至9中任一项所述的方法，其特征在于，所述制狗脊饮片为将生狗脊片照《中药药典》2015年版通则0213炮制制得；其中，所述生狗脊片为壳蕨科植物金毛狗脊Cibcnium barometz(L.)J.Sm.的干燥根茎，秋、冬二季采挖，除去泥沙，干燥；或去硬根、叶柄及金黄色绒毛，切厚片，干燥，制得生狗脊片。

13.根据权利要求12所述的方法，其特征在于，所述制狗脊饮片为烫狗脊，照烫法用砂烫至鼓起，放后除去残存绒毛制得。