[发明专利]一种超声联合双酶解提高西瓜籽多肽抗氧化稳定性的方法

权利要求书

1.一种超声联合双酶解提高西瓜籽多肽抗氧化稳定性的方法，其特征在于按照以下步骤进行：

(1)称取西瓜籽蛋白，加入蒸馏水配置成0.2-0.6％(m/v)悬浊液，混合均匀后，调节蛋白溶液的pH值为7.5-9.5，进行超声联合风味蛋白酶和碱性蛋白酶双酶酶解处理西瓜籽蛋白，超声功率100-300W，温度30-55℃，蛋白酶与底物的比例为1-5％(w/w)，酶解时间20-50min，沸水浴10min灭酶，终止酶解反应，在4500r/min转速下离心10min，获得上清液，再经过脱盐、浓缩、冷冻干燥，得到西瓜籽蛋白水解物；

(2)将步骤(1)得到的西瓜籽蛋白水解物置于锥形瓶中，调节pH为2.0，按照料液比为1:30-1:70(g/mL)加入胃消化液，混合均匀并快速置于30-37℃恒温水浴摇床中，酶解1-4h，得到西瓜籽多肽胃蛋白酶解液；

(3)将步骤(2)得到西瓜籽多肽胃蛋白酶解液的pH值调节为7.5±0.1，按照体积比为1:1-5:1加入肠消化液，混匀后快速置于30-37℃恒温水浴摇床中，酶解1-4h，沸水浴10min灭酶，终止酶解反应，在4500r/min转速下离心10min，取上清液，再经过脱盐、浓缩、冷冻干燥，得到西瓜籽多肽肠蛋白酶解物。

2.根据权利要求1所述的一种超声联合双酶解提高西瓜籽多肽抗氧化稳定性的方法，其特征在于其中步骤(1)中所述的超声装置为聚能式超声，超声联合风味蛋白酶和碱性蛋白酶双酶酶解是指风味蛋白酶和碱性蛋白酶同时酶解的过程中施加超声处理，其中风味蛋白酶和碱性蛋白酶的添加顺序为同时添加；风味蛋白酶与碱性蛋白酶的比例为1:1(w/w)，风味蛋白酶的酶活力为1.06×10⁶U/g，碱性蛋白酶的酶活力为23400U/mL。

3.根据权利要求1所述的一种超声联合双酶解提高西瓜籽多肽抗氧化稳定性的方法，其特征在于其中步骤(2)中胃消化液的组成为：0.2g NaCl，0.32g胃蛋白酶，加入0.7mL的3mol/L盐酸溶液，充分混匀，调节pH值为1.2，加蒸馏水定容至100mL；胃蛋白酶的酶活力为3000U/mg。

4.根据权利要求1所述的一种超声联合双酶解提高西瓜籽多肽抗氧化稳定性的方法，其特征在于其中步骤(3)中肠消化液组成为：0.175g磷酸二氢钾，加入5mL的0.2mol/L的氢氧化钠溶液，充分混匀，调节pH值为6.4±0.1，再加入0.25g胰蛋白酶，加蒸馏水定容至100mL；胰蛋白酶的酶活力为250U/mg。