[发明专利]一种组织特异性侵袭试剂盒的制备方法

权利要求书

1.一种组织特异性侵袭试剂盒的制备方法，其特征在于所述制备方法为：通过手术获取动物的不同组织器官，组织器官包括骨、肺、肝、肾、胃、肠、胰腺、脑的组织器官，获取后对组织器官依次进行双蒸水冲洗处理、由洗脱剂混合溶液脱细胞处理和负压冷冻干燥处理，负压冷冻干燥后，在消化液中消化，形成细胞外基质水溶液，按照终浓度为10μg/μl与普通液态基质胶进行混匀，制成组织特异性基质胶，装盒后即成组织特异性侵袭试剂盒。

2.根据权利要求1所述的一种组织特异性侵袭试剂盒的制备方法，其特征在于所述洗脱剂混合溶液脱细胞处理后，在干重条件下脱细胞材料中DNA残余百分比小于5％，且经HE染色后未见明显细胞核残留，脱细胞组织中保留多种主要细胞外基质成分，包括胶原、纤维蛋白、蛋白多糖类以及无机物。

3.根据权利要求1或2所述一种组织特异性侵袭试剂盒的制备方法，其特征在于所述洗脱剂混合溶液为Triton X-100、十二烷基硫酸钠(SDS)、氨水、DNA酶、RNA酶、乙二胺四乙酸二钠(EDTA)、脱氧胆酸钠(DOC)中的二种或二种以上；洗脱剂混合溶液震荡洗脱时间为3-4周，3天换一次洗脱液，摇床震荡速度为100转/分钟。

4.根据权利要求3所述一种组织特异性侵袭试剂盒的制备方法，其特征在于所述洗脱剂混合溶液为1％Triton X-100+0.1％氨水组合。

5.根据权利要求1所述的一种组织特异性侵袭试剂盒的制备方法，其特征在于所述消化液为0.01M HCl+2mg/ml胃蛋白酶。

6.根据权利要求1所述的一种组织特异性侵袭试剂盒的制备方法，其特征在于所述组织特异性基质胶经0.22μm滤器过滤除菌。

7.根据权利要求1或2或5或6所述的一种组织特异性侵袭试剂盒的制备方法，其特征在于所述组织特异性基质胶采用传统基质胶实验方法对多种细胞的侵袭能力进行检测。

8.根据权利要求7所述一种组织特异性侵袭试剂盒的制备方法，其特征在于所述多种细胞为各种类型细胞，包括胃癌、结直肠癌、肺癌、肝癌、胰腺癌、胆囊癌、乳腺癌、前列腺癌、胶质瘤的肿瘤细胞以及各种正常细胞，所述的细胞为各种来源细胞，包括大鼠、小鼠、牛、猪、兔、狗、猴的来源组织。