[发明专利]一种检测AURKA基因多态性的探针及方法在审
| 申请号: | 201910097074.4 | 申请日: | 2019-01-31 |
| 公开(公告)号: | CN111500711A | 公开(公告)日: | 2020-08-07 |
| 发明(设计)人: | 毛丹丹;黄芬芬;张奕 | 申请(专利权)人: | 上海中优精准医疗科技股份有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/6886 | 分类号: | C12Q1/6886;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 200433 上海市杨浦*** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 检测 aurka 基因 多态性 探针 方法 | ||
1.一种检测AURKA基因多态性的方法,其特征在于,包括以下步骤:
L1 确定AURKA基因突变位点;
L2 根据突变位点设计并合成探针和引物;
L3 将被检测的AURKA目标基因、探针、引物和酶混合进行荧光定量PCR,并监测荧光信号;
L4 计算杂交峰所显示的Tm值,根据Tm值判断AURKA基因的类型。
2.如权利要求1所述的检测AURKA基因多态性的方法,其特征在于,所述的AURKA基因突变位点包括rs2273535。
3.如权利要求1或2所述的检测AURKA基因多态性的方法,其特征在于,所述的引物包括SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2。
4.如权利要求1所述的检测AURKA基因多态性的方法,其特征在于,所述的检测荧光信号的方法为:在PCR熔解温度为45-80℃时,每升温1℃记录3-5次荧光信号。
5.一种适用于权利要求1-4中任意一项所述用于检测AURKA基因多态性的探针,其特征在于,所述探针的核苷酸序列包括SEQ ID NO.3。
6.如权利要求5所述的探针,其特征在于,所述的探针携带有可检测标记物。
7.如权利要求6所述的探针,其特征在于,所述的可检测标记物为荧光标记物。
8.如权利要求7所述的探针,其特征在于,所述荧光标记物包括ROX荧光标记物和BHQ荧光标记物;所述ROX荧光标记物设于探针5′端,所述BHQ荧光标记物设于探针3′端。
9.一种检测AURKA基因多态性的方法,其特征在于,包括可以特异识别核酸序列的荧光标记探针,通过与靶序列进行杂交后发生构象的变化而释放荧光染料,根据杂交后产生不同温度的峰图判定分型结果。
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