[发明专利]一种重组的非洲猪瘟病毒CD2V亚单位蛋白及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种重组的非洲猪瘟病毒CD2V亚单位蛋白，其特征在于，所述重组的非洲猪瘟病毒CD2V亚单位蛋白包括非洲猪瘟病毒表面囊膜蛋白的胞外区和胞内区，其氨基酸序列如SEQID NO.3所示。

2.根据权利要求1所述的重组的非洲猪瘟病毒CD2V亚单位蛋白，其特征在于，密码子优化后的非洲猪瘟病毒CD2V蛋白基因序列如SEQ ID NO.1所示。

3.一种制备如权利要求1～2任一所述的重组的非洲猪瘟病毒CD2V亚单位蛋白的方法，

其特征在于，所述方法包括以下步骤：

1)将密码子优化后的非洲猪瘟病毒CD2V蛋白如SEQ ID NO.1所示的编码基因序列克隆到真核表达载体中，得到含有非洲猪瘟病毒CD2V亚单位蛋白编码基因的重组质粒；

2)再将所述含有非洲猪瘟病毒CD2V亚单位蛋白编码基因的重组质粒转染至表达系统的细胞中；

3)通过培养、筛选、驯化步骤2)中所述细胞株，得到高度表达的细胞株；

4)发酵培养3)中所述的细胞株，纯化后，得到如SEQ ID NO.3所示非洲猪瘟病毒亚单位蛋白。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述真核表达载体为pEE12.4。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述表达系统的细胞包括酵母，哺乳动物细胞以及昆虫细胞。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述哺乳动物细胞为CHO细胞或293T细胞。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述CHO细胞包括DG44、DXB11、CHO-K1、CHO-S细胞株。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述CHO细胞为CHO-K1细胞株。

9.一种根据权利要求1-2任一所述的重组的非洲猪瘟病毒CD2V亚单位蛋白在制备用于诊断、预防和治疗非洲猪瘟的疫苗中的应用。