[发明专利]一种羰基还原酶催化合成手性邻位卤代-α-苯乙醇的方法有效
| 申请号： | 201910062321.7 | 申请日： | 2019-01-23 |
| 公开（公告）号： | CN110129382B | 公开（公告）日： | 2020-12-08 |
| 发明（设计）人： | 李爱朋;张连兵 | 申请（专利权）人： | 西北工业大学 |
| 主分类号： | C12P7/22 | 分类号： | C12P7/22;C12N9/04;C12N15/53;C12N15/10;C12R1/19;C12R1/07 |
| 代理公司： | 西安维赛恩专利代理事务所(普通合伙) 61257 | 代理人： | 刘艳霞 |
| 地址： | 710072 陕西*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 羰基 还原酶 催化 合成 手性 邻位卤代 乙醇 方法 | ||
1.羰基还原酶BaSDR1或含有羰基还原酶BaSDR1的工程菌在将潜手性邻位卤代苯乙酮不对称还原制备手性邻位卤代-α-苯乙醇中的应用；所述潜手性邻位卤代苯乙酮的结构通式如式I所示：
其中：X为F，R1为氢、F或3’或4’位取代的Cl或Br；或者，X为Cl时，R1为氢；
所述羰基还原酶BaSDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。
2.手性邻位卤代-α-苯乙醇的制备方法，其特征在于，以潜手性邻位卤代苯乙酮为底物，羰基还原酶BaSDR1或含有羰基还原酶BaSDR1的工程菌全细胞为催化剂，在20～55℃下，于pH 5.5～10.5的缓冲液构成的转化反应体系中反应，反应完全后，将反应液分离纯化即得；其中，还需加入终浓度为1～50％的醇或糖作为辅底物；当选用羰基还原酶BaSDR1为催化剂时，还需加入辅酶；
所述潜手性邻位卤代苯乙酮的结构通式如式I所示：
其中：X为F，R1为氢、F或3’或4’位取代的Cl或Br；或者，X为Cl时，R1为氢；
所述辅酶为NADH或NADPH；
所述羰基还原酶BaSDR1的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。
3.根据权利要求2所述的手性邻位卤代-α-苯乙醇的制备方法，其特征在于，所述转化反应体系中潜手性邻位卤代苯乙酮底物的初始浓度为5～300mmol/L；所述羰基还原酶的浓度为0.1～2.0mg/mL，或者含有羰基还原酶BaSDR1的工程菌的菌体的质量用量以菌体湿重计为10～400g/L。
4.根据权利要求2或3所述的手性邻位卤代-α-苯乙醇的制备方法，其特征在于，所述羰基还原酶BaSDR1来源于菌株Bacillus aryabhattai NWPU-1801；保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M 2018700，保藏地址是中国武汉，武汉大学。
5.根据权利要求4所述的手性邻位卤代-α-苯乙醇的制备方法，其特征在于，所述糖为葡萄糖，其质量浓度为10％。
6.根据权利要求5所述的手性邻位卤代-α-苯乙醇的制备方法，其特征在于，所述含有羰基还原酶BaSDR1的工程菌为E.coli BL21(DE3)/pET30a-Basdr1。
7.根据权利要求2或3所述的手性邻位卤代-α-苯乙醇的制备方法，其特征在于，所述羰基还原酶BaSDR1的制备方法如下：培养工程菌E.coli BL21(DE3)/pET30a-Basdr1，诱导获得重组羰基还原酶。
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