[发明专利]用于体外规模化生产红细胞的中空纤维管和方法

权利要求书

1.一种用于体外规模化生产红细胞的中空纤维管，其特征在于，所述中空纤维管的直径为200-1000μm，且设置为其内腔能够流通基础培养基和/或气体，其末端能够与基础培养基容器和/或氧气储存器连通；所述中空纤维管的管壁厚度为35-50μm，所述中空纤维管在沿管壁的厚度方向上具有外侧的纳米级微孔分布的第一层，和与所述第一层相比具有较大孔径且相对疏松的面向中空纤维内腔的第二层，且设置为允许所述基础培养基的成分和/或气体从所述中空纤维管的内腔一侧穿过所述管壁到达外侧；在所述中空纤维管的至少管壁的外表面具有适于细胞脱核的季铵基团，所述中空纤维管通过下述方法制备得到：将中空纤维浸泡于含氯甲醚的有机溶剂中，然后加入无机促进剂进行活化，活化反应结束后，进一步用去离子水清洗活化后的中空纤维，并将其在60-85℃烘干，从而得到活化中空纤维，将活化中空纤维于室温下，在20-40％三甲胺的溶液中浸泡30-50小时。

2.根据权利要求1所述的用于体外规模化生产红细胞的中空纤维管，其特征在于，所述管壁的外表面的电位为1.20×10^-3至4.0×10^-3V。

3.根据权利要求1所述的用于体外规模化生产红细胞的中空纤维管，其特征在于，所述基础培养基选自SFEM培养基和IMDM培养基，且不含血清白蛋白。

4.根据权利要求1所述的用于体外规模化生产红细胞的中空纤维管，其特征在于，所述中空纤维管的透水量为50-500mL/m²/hr/mmHg。

5.一种用于体外规模化生产红细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)使至少部分基础培养基和/或氧气连续地从中空纤维管的内腔通过管壁进入并填充至脱核分化室；

(2)使红系祖细胞在所述脱核分化室内与所述中空纤维管的管壁的外表面接触，其中在所述脱核分化室内添加有分化因子；

(3)使所述脱核分化室内产生的废物随至少部分培养基一起通过管壁进入至所述中空纤维管的内腔，并流出至所述脱核分化室外；

其中，所述中空纤维管的直径为200-1000μm，且设置为其内腔能够流通基础培养基和/或气体，其末端能够与基础培养基容器和/或氧气储存器连通；所述中空纤维管的管壁厚度为35-50μm，所述中空纤维管在沿管壁的厚度方向上具有外侧的纳米级微孔分布的第一层，和与所述第一层相比具有较大孔径且相对疏松的面向中空纤维内腔的第二层，且设置为允许所述基础培养基的成分和/或气体从所述中空纤维管的内腔一侧穿过所述管壁到达外侧；在所述中空纤维管的至少管壁的外表面具有适于细胞脱核的季铵基团。

6.根据权利要求5所述的用于体外规模化生产红细胞的方法，其特征在于，所述步骤(1)-(3)同时进行。

7.根据权利要求5所述的用于体外规模化生产红细胞的方法，其特征在于，所述分化因子包括Epo、铁饱和的转铁蛋白和IGF-l。

8.根据权利要求5所述的用于体外规模化生产红细胞的方法，其特征在于，所述基础培养基为含有L-谷氨酰胺、2-巯基乙醇和铁离子的IMDM培养基，且在所述脱核分化室内进一步补充选自BSA、人胰岛素、Epo、转铁蛋白和IGF-l组成的组中的至少之一。

9.根据权利要求5所述的用于体外规模化生产红细胞的方法，其特征在于，所述基础培养基为SFEM培养基，且在所述脱核分化室内进一步补充选自BSA、Epo、铁饱和的转铁蛋白和IGF-l组成的组中的至少之一。