[发明专利]在体内从单特异性抗体产生多特异性抗体的方法

权利要求书

1.多聚体多肽，其包含

第一多肽，其包含

i)以N端至C端方向，a)选自特异地与第一靶标结合的一对抗体轻链可变域和抗体重链可变域的第一抗体可变域，和b)第一人免疫球蛋白G CH3结构域，

ii)特异地与第二靶标结合的一对抗体轻链可变域和抗体重链可变域，位于第一抗体可变域的N端或第一CH3结构域的C端，

第二多肽，其包含

i)以N端至C端方向，a)选自特异地与第三靶标结合的一对抗体轻链可变域和抗体重链可变域的第二抗体可变域，和b)第二人免疫球蛋白G CH3结构域，

其中如果第一抗体可变域是抗体重链可变域，则第二抗体可变域是抗体轻链可变域，或如果第一抗体可变域是抗体轻链可变域，则第二抗体可变域是抗体重链可变域，

以及

其中第二CH3结构域包含干扰突变，所述突变选自D356K,E357K,K370E和K439E，由此，第一CH3结构域包含

a)第439位的氨基酸残基K，如果干扰突变是D356K，或

b)第370位的氨基酸残基K，如果干扰突变是E357K，或

c)第357位的氨基酸残基E，如果干扰突变是K370E，或

d)第356位的氨基酸残基D，如果干扰突变是K439E，

和

ii)可选地，特异地与第二或第四靶标结合的一对抗体轻链可变域和抗体重链可变域，位于第二抗体可变域的N端或第二CH3结构域的C端，

其中所有编号均根据Kabat EU索引进行。

2.多聚体多肽，其包含

第一多肽，其包含

i)以N端至C端方向，a)第一人免疫球蛋白G CH3结构域，和b)选自特异地与第一靶标结合的一对抗体轻链可变域和抗体重链可变域的第一抗体可变域，

ii)特异地与第二靶标结合的一对抗体轻链可变域和抗体重链可变域，位于第一CH3结构域的N端或第一可变域的C端，

第二多肽，其包含

i)以N端至C端方向，a)第二人免疫球蛋白G CH3结构域，和b)选自特异地与第三靶标结合的一对抗体轻链可变域和抗体重链可变域的第二抗体可变域，

其中如果第一抗体可变域是抗体重链可变域，则第二抗体可变域是抗体轻链可变域；或如果第一抗体可变域是抗体轻链可变域，则第二抗体可变域是抗体重链可变域，

以及

其中第二CH3结构域包含干扰突变，所述突变选自D356K、E357K、K370E和K439E，由此，第一CH3结构域包含

a)第439位的氨基酸残基K，如果干扰突变是D356K，或

b)第370位的氨基酸残基K，如果干扰突变是E357K，或

c)第357位的氨基酸残基E，如果干扰突变是K370E，或

d)第356位的氨基酸残基D，如果干扰突变是K439E，

和

ii)可选地，特异地与第二或第四靶标结合的一对抗体轻链和重链可变域，位于第二CH3结构域或第二可变域的N端，

其中所有编号均根据Kabat EU索引进行。

3.根据权利要求1至2之任一的多聚体多肽，其中第一CH3结构域和第二CH3结构域还包含促进所述第一CH3结构域和所述第二CH3结构域之间异二聚体形成的突变，所述突变不同于干扰突变。

4.根据权利要求1至3之任一的多聚体多肽，其中

第一CH3结构域包含

a)T366W突变，或

b)T366S/L368A/Y407V突变，

以及

第二CH3结构域包含

a)T366S/L368A/Y407V突变，如果第一CH3结构域包含T366W突变，或

b)T366W突变，如果第一CH3结构域包含T366S/L368A/Y407V突变。

5.根据权利要求1至4之任一的多聚体多肽，其中第一多肽和第二多肽是非共价二聚体。

6.根据权利要求1至5之任一的多聚体多肽，其中第一可变域和第二可变域形成非功能性结合位点。