[发明专利]使用渗透不平衡除去和重新插入膜中的蛋白纳米孔

权利要求书

1.更新测序室的方法，所述方法包括：

提供将所述测序室的第一电解质储器与所述测序室的第二电解质储器分开的膜，其中所述膜包含初始纳米孔，且其中所述第一电解质储器具有第一初始摩尔渗透压浓度，且所述第二电解质储器具有第二初始摩尔渗透压浓度；

使第一电解质溶液流至所述第一电解质储器，其中所述第一电解质溶液具有不同于所述第一初始储器摩尔渗透压浓度的第一电解质溶液摩尔渗透压浓度，由此引起所述第一电解质储器具有不同于所述第一初始摩尔渗透压浓度的新的摩尔渗透压浓度；

由于所述新的摩尔渗透压浓度和所述第二初始摩尔渗透压浓度之间的差异，从所述膜喷射所述初始纳米孔；

将第二电解质溶液添加至所述第一电解质储器，其中所述第二电解质溶液包含多个置换纳米孔，其中所述第二电解质溶液具有的第二电解质溶液摩尔渗透压浓度比所述第一电解质溶液摩尔渗透压浓度更接近于所述第二初始摩尔渗透压浓度；和

将多个置换纳米孔之一插入所述膜中。

2.权利要求1的更新测序室的方法，其中所述插入包括应用电压，所述电压优选为跨所述膜的交流电压。

3.权利要求1或2的更新测序室的方法，其中所述第一电解质溶液摩尔渗透压浓度与所述第一初始摩尔渗透压浓度的比率大于或等于1.05。

4.权利要求1或2的更新测序室的方法，其中所述第一电解质溶液摩尔渗透压浓度与所述第二电解质溶液摩尔渗透压浓度的比率大于或等于1.05。

5.权利要求1或2的更新测序室的方法，其中所述第二电解质溶液摩尔渗透压浓度与所述第一初始摩尔渗透压浓度的比率在0.85至1.15的范围内。

6.权利要求1或2的更新测序室的方法，其中所述膜包含脂质双层。

7.权利要求1或2的更新测序室的方法，其中所述膜包含三嵌段共聚物。

8.权利要求1或2的更新测序室的方法，其中初始纳米孔复合物包含所述初始纳米孔、初始模板和初始聚合酶，所述初始纳米孔复合物与所述初始纳米孔一起被喷射；且其中多个置换纳米孔复合物各自包含多个置换纳米孔之一、置换模板和置换聚合酶。

9.权利要求1或2的更新测序室的方法，其中所述初始纳米孔选自外膜蛋白G (OmpG)；细菌淀粉样蛋白分泌通道CsgG；耻垢分枝杆菌孔蛋白A (MspA)；α-溶血素(α-HL)；及其任何组合。

10.用于更新测序室的系统，所述系统包括：

流体腔室，所述流体腔室包括所述测序室的第一电解质储器、所述测序室的第二电解质储器以及将所述第一电解质储器与所述第二电解质储器分开的膜，其中所述膜包含初始纳米孔，且其中所述第一电解质储器具有第一初始摩尔渗透压浓度，且所述第二电解质储器具有第二初始摩尔渗透压浓度；

控制溶液流至所述第一电解质储器的流子系统；

多个置换纳米孔；

经配置为跨所述膜应用电压的电压源，其优选为交流电压源；和

控制电路，其与所述电压源和所述流子系统可通信地耦合以执行包括以下的操作：

用于使第一电解质溶液流至所述第一电解质储器的装置，其中所述第一电解质溶液具有不同于所述第一初始储器摩尔渗透压浓度的第一电解质溶液摩尔渗透压浓度，由此引起所述第一电解质储器具有不同于所述第一初始摩尔渗透压浓度的新的摩尔渗透压浓度，以便从所述膜喷射所述初始纳米孔；

用于将第二电解质溶液添加至所述第一电解质储器的装置，其中所述第二电解质溶液包含多个置换纳米孔，且其中所述第二电解质溶液具有的第二电解质溶液摩尔渗透压浓度比所述第一电解质溶液摩尔渗透压浓度更接近于所述第二初始摩尔渗透压浓度；和

用于跨所述膜应用电压以便将多个置换纳米孔之一插入所述膜中的装置。