[发明专利]原代培养方法在审
| 申请号: | 201880053730.4 | 申请日: | 2018-08-21 |
| 公开(公告)号: | CN111051495A | 公开(公告)日: | 2020-04-21 |
| 发明(设计)人: | 高桥祐生;北野史朗;片山量平;长山聪 | 申请(专利权)人: | 凸版印刷株式会社;公益财团法人癌研究会 |
| 主分类号: | C12M3/00 | 分类号: | C12M3/00;C12N1/00;C12N5/07 |
| 代理公司: | 永新专利商标代理有限公司 72002 | 代理人: | 白丽 |
| 地址: | 日本*** | 国省代码: | 暂无信息 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 培养 方法 | ||
1.一种原代培养方法,其是在体外对从生物体采集的组织中所含的细胞进行原代培养的原代培养方法,其中,
将从生物体采集的组织中的细胞接种至含有构成间质的细胞、且单层的或2个以上的细胞层在厚度方向上层叠的细胞结构体的顶面上,进行培养。
2.根据权利要求1所述的原代培养方法,其中,将从所述生物体采集的所述组织的碎片化物、从所述生物体采集的所述组织的酶处理物、或者由从所述生物体采集的所述组织中回收的细胞接种在所述细胞结构体的所述顶面来进行培养。
3.根据权利要求1或2所述的原代培养方法,其中,所述细胞结构体含有选自成纤维细胞、周细胞、内皮细胞及免疫细胞中的1种以上作为构成所述间质的细胞。
4.根据权利要求3所述的原代培养方法,其中,所述内皮细胞是选自血管内皮细胞及淋巴管内皮细胞中的1种以上。
5.根据权利要求1~4中任一项所述的原代培养方法,其中,所述细胞结构体具备脉管网结构。
6.根据权利要求1~5中任一项所述的原代培养方法,其中,所述细胞结构体的厚度为5μm以上。
7.根据权利要求1~5中任一项所述的原代培养方法,其中,所述细胞结构体的厚度为150μm以上。
8.根据权利要求1~7中任一项所述的原代培养方法,其中,从所述生物体采集的所述组织含有肿瘤组织。
9.根据权利要求8所述的原代培养方法,其中,
在将从所述生物体采集的所述组织进行碎片化之后,从所得的碎片化物中分选出癌细胞,
将分选出的所述癌细胞接种在所述细胞结构体的所述顶面上来进行培养。
10.根据权利要求9所述的原代培养方法,其中,在从所述碎片化物中分选所述癌细胞时,利用选自流式细胞仪、磁性分离、介电泳、尺寸分级及密度梯度分级中的1种以上的手法来分选所述癌细胞。
11.根据权利要求1~10中任一项所述的原代培养方法,其中,通过以下工序来构筑所述细胞结构体:
在阳离子性缓冲液中,将至少含有构成间质的细胞的细胞与强电解质高分子及细胞外基质成分混合,获得混合物的工序(a);
将通过所述工序(a)获得的所述混合物接种在细胞培养容器中的工序(b);以及
在所述工序(b)后,在所述细胞培养容器中获得至少含有构成间质的细胞的细胞多层地层叠而成的细胞结构体的工序(c)。
12.一种含原代培养细胞的细胞结构体,其在含有构成间质的细胞、且单层的或2个以上的细胞层在厚度方向上层叠的间质细胞层的顶面上具备由从生物体采集的组织中所含的细胞形成的细胞层。
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