[发明专利]用于合成含有N-取代氨基酸的肽的方法

权利要求书

1.生产包含至少一个N-取代的氨基酸或N-取代的氨基酸类似物的肽的方法，其中所述方法包括以下步骤：

1)制备包含以下官能团i)和ii)中至少一个的氨基酸(Fmoc保护的氨基酸)、包含以下i)和ii)中至少一个的氨基酸类似物(Fmoc保护的氨基酸类似物)、或包含Fmoc保护的氨基酸和Fmoc保护的氨基酸类似物之一或二者的肽(Fmoc保护的肽)：

i)被至少一个具有Fmoc骨架的保护基保护的主链氨基；和

ii)至少一个游离羧酸基或活性酯化羧酸基；

2)将步骤1)中制备的Fmoc保护的氨基酸、Fmoc保护的氨基酸类似物或Fmoc保护的肽支持到固相上；

3)通过使用碱以暴露其氨基，将支持在固相上的Fmoc保护的氨基酸、Fmoc保护的氨基酸类似物或Fmoc保护的肽的具有Fmoc骨架的保护基脱保护；

4)通过添加新的Fmoc保护的氨基酸、新的Fmoc保护的氨基酸类似物或新的Fmoc保护的肽，形成酰胺键；和

5)在比TFA弱的酸性条件下，将步骤4)中获得的肽从固相切下。

2.权利要求1的生产方法，其中，构成步骤4)中获得的肽的氨基酸或氨基酸类似物的至少一个侧链被保护基保护，所述保护基在碱性条件下不脱保护，但被第一酸脱保护，并且其中，所述方法进一步包括在步骤5)之前或之后，使用所述第一酸使所述保护基脱保护的步骤；和

其中在步骤5)中，使用第二酸将所述肽切下，和

其中所述第一酸和所述第二酸均为比TFA更弱的酸，并且所述第一酸的酸度高于所述第二酸的酸度。

3.生产包含至少一个N-取代的氨基酸或N-取代的氨基酸类似物的肽的方法，其中所述方法包括以下步骤：

1)制备包含以下官能团i)和ii)中至少一个的氨基酸(Fmoc保护的氨基酸)、包含以下官能团i)和ii)中至少一个的氨基酸类似物(Fmoc保护的氨基酸类似物)、或包含Fmoc保护的氨基酸和Fmoc保护的氨基酸类似物之一或二者的肽(Fmoc保护的肽)：

i)被至少一个具有Fmoc骨架的保护基保护的主链氨基；和

ii)至少一个游离羧酸基或活性酯化羧酸基；

2)通过使用碱以暴露其氨基，将Fmoc保护的氨基酸、Fmoc保护的氨基酸类似物或Fmoc保护的肽的具有Fmoc骨架的保护基脱保护；

3)通过添加新的Fmoc保护的氨基酸、新的Fmoc保护的氨基酸类似物或新的Fmoc保护的肽形成酰胺键，其中构成在该步骤中获得的肽的氨基酸或氨基酸类似物的至少一个侧链具有保护基,所述保护基在碱性条件下不脱保护,并且在具有比TFA更弱的酸性的条件下脱保护；和

4)在具有比TFA更弱的酸性的条件下，将所述侧链的保护基脱保护。

4.权利要求3的生产方法，其中肽生产是通过固相方法进行的。

5.权利要求4的生产方法，其进一步包括在步骤4)之前或之后，在比步骤4)中使用的弱酸性条件更弱的条件下，从固相上切下步骤3)中获得的肽的步骤。

6.权利要求3的生产方法，其中肽生产是通过液相方法进行的。

7.权利要求1-6中任一项的生产方法，其中权利要求1的步骤4)或权利要求3的步骤3)进一步包含以下步骤：

通过使用碱以暴露其氨基，将新添加的Fmoc保护的氨基酸、新添加的Fmoc保护的氨基酸类似物或新添加的Fmoc保护的肽上具有Fmoc骨架的保护基脱保护；

通过进一步添加新的Fmoc保护的氨基酸、新的Fmoc保护的氨基酸类似物或新的Fmoc保护的肽，形成酰胺键,

并且其中这些步骤重复一次或多次。

8.权利要求1-7中任一项的生产方法，其中所制备的肽在其C末端侧包含含有一个反应位点的氨基酸残基或氨基酸类似物残基，并且在其N末端侧包含含有另一个反应位点的氨基酸残基、氨基酸类似物残基或羧酸类似物。

9.权利要求8的生产方法，其进一步包括使所述反应位点和所述另一反应位点键合以环化所述肽的步骤。