[发明专利]测定试剂用胶乳粒子、致敏胶乳粒子及免疫比浊法用测定试剂

说明书

本发明涉及测定试剂用胶乳粒子，所述测定试剂用胶乳粒子的粒径的变异系数是10％以下、平均粒径是250～1000nm，所述胶乳粒子包含20重量％以上的折射率1.60以上的化合物，将所述胶乳粒子分散在超纯水中得到的固形成分浓度1重量％的分散液加入主体内径10.8mm的圆筒状10mL量筒中静置10天时的上清液深度为5mm以内。利用所述粒子，即使在测定被检物质的浓度稀薄的测定样品的情况，也能进行高灵敏度的测定。

技术领域

本发明涉及一种即使在对被检物质的浓度稀薄的测定样品进行测定的情况下也能够实现高灵敏度的测定的测定试剂用胶乳粒子。另外，本发明还涉及使用了测定试剂用胶乳粒子的致敏胶乳粒子及免疫比浊法用测定试剂。

背景技术

在以临床检查为首的各种领域中，作为将测定试剂中的微量的被检物质定量的方法，广泛使用利用了抗原抗体反应的免疫学的测定法。其中，将胶乳粒子作为抗原或抗体的载体来使用的胶乳免疫比浊法操作简便，并且测定所需的时间短。因此，采用胶乳免疫比浊法作为测定方法的微量被检物质的种类在进一步增加。

对于基于胶乳免疫比浊法的测定样品中的抗原或抗体等被检物质的定量，可以通过在光学上检测因负载有抗原或抗体的胶乳粒子(以下也称作“致敏胶乳粒子”)的凝聚而产生的吸光度的变化来进行。该吸光度的变化是基于来自于因致敏胶乳粒子的凝聚而形成的凝聚块的表观粒径的变化而产生的。

以往，对于在胶乳免疫比浊法中作为载体来使用的胶乳粒子而言，由于抗原或抗体的致敏(固定化)容易、比较廉价、并且聚合反应也容易控制，因此一直使用着以聚苯乙烯作为主成分的聚苯乙烯系胶乳粒子(专利文献1等)。但是，在将聚苯乙烯系胶乳粒子作为胶乳免疫比浊法中的载体来使用的情况下，如果测定样品中的被检物质的浓度稀薄，则所形成的凝聚块的数目就会变少，另外，与被检物质的浓度相对于胶乳粒子数处于适当的范围时的情况相比，凝聚块的表观粒径也变小，因此，存在无法获得充分的灵敏度的问题。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：国际公开第2003-005031号

专利文献2：日本特开2008-215816号

专利文献3：日本特开2001-296299号

专利文献4：国际公开第2012-133771号

发明概述

发明要解决的问题

作为提高灵敏度的方法，主要有两种。(1)第一是增大胶乳粒子的粒径。当粒径大时，吸光系数变大，因此即使为稀薄浓度，也变得容易检出凝集变化的差异。(2)第二是提高胶乳粒子的折射率，结果是提高了吸光系数。这是因为如果为相同粒径，则对折射率较高的胶乳粒子一方而言，其吸光系数较高，因此即使在较稀薄的环境中也能够维持检测灵敏度。

但是，对于(1)，如果胶乳粒子的粒径增得太大，则胶乳粒子在测定中沉降或在保存中沉到保存容器的底部，从而存在测定误差增大、显著损害存储稳定性的问题。

为了改善这一点，在专利文献2中提出了使用具有单孔中空结构的胶乳粒子的方法，尽管解决了沉降的问题，但是来自单孔中空结构的吸光系数低下，降低了检测的灵敏度，因此不能实现实质地提高灵敏度。对于(2)，例如，在专利文献3和4中提出了通过使用由高折射率材料构成的胶乳粒子来提高灵敏度的方法。但是，高折射率的材料通常比重大、粒子重量重，因此仅当粒径小于300nm时才能作为试剂实用化，在提高灵敏度方面存在限制。

本发明的目的是提供测定试剂用胶乳粒子，所述测定试剂用胶乳粒子即使在对被检物质的浓度稀薄的测定样品进行测定的情况下也能够实现高灵敏度的测定。

用于解决问题的方法