[发明专利]获得莳萝的小RNA富集水性提取物的方法

权利要求书

1.一种从植物材料获得莳萝(Anethum graveolens)地上部分的水性提取物的方法，所述提取物富集最大长度为150个核苷酸的小RNA，所述方法包含以下步骤：

a)将莳萝地上部分与水接触；

b)将乙二胺四乙酸(EDTA)四钠以2mM至15mM之间的浓度加入到a)中获得的混合物中，混合物的pH在10.5至11之间，在20℃至80℃之间的温度加热并且搅拌所述混合物至少1小时；

c)然后将b)中获得的混合物的pH调节至6至8之间的值；

d)纯化c)中获得的混合物，以消除残留的固体植物材料并获得纯化的粗制水性提取物；

e)检查pH，并将其重新调节为6至8之间的值；并且

所述获得的水性提取物，以相对于所述提取物总重量的重量计，包含10至30g/kg的干重提取物，2至10g/kg的蛋白质片段，2至10g/kg的糖，0.2至3g/kg的氨基酸，100至2000mg/kg的酚化合物，10至100mg/kg的最大长度为150个核苷酸的低分子量RNA，并且不包含DNA，

其中所述地上部分指叶、茎和花，不包括种子。

2.权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤a)中，将预先干燥然后研磨的植物材料以植物材料/水为4至20重量％的比率与水接触。

3.权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤d)中，将在c)中获得的所述混合物离心。

4.权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤e)之前对在d)中获得的所述粗制水性提取物进行至少一次过滤，并且通过将过滤阈值从20-50μm降低至0.1-0.30μm来连续过滤所述粗制水性提取物。

5.权利要求1所述的方法，其特征在于，乙二胺四乙酸(EDTA)四钠的浓度为10mM。

6.权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤e)中，重新调节pH值为6至6.5之间的值。

7.权利要求1所述的方法获得的、富集最大长度为150个核苷酸的小RNA并且不包含DNA的莳萝地上部分的水性提取物，其特征在于，其包含：以相对于所述提取物总重量的重量计，10至30g/kg的干重提取物，2至10g/kg的蛋白质片段，2至10g/kg的糖，0.2至3g/kg的氨基酸，100至2000mg/kg的酚化合物，以及10至100mg/kg的最大长度为150个核苷酸的低分子量RNA，并且不包含DNA。

8.权利要求7所述的提取物，其特征在于，其在溶剂中稀释并且以相对于所述提取物总重量的重量计，包含5至15g/kg的干提取物，50至1000mg/kg的多酚，0.5至10g/kg的蛋白质片段，0.5至10g/kg的糖，0.1至1g/kg的氨基酸，以及10至100mg/kg的最大长度为150个核苷酸的小RNA。