[发明专利]冠状病毒、包含其的疫苗以及预防疾病的方法

权利要求书

1.一种活的减毒冠状病毒，包含编码多蛋白的变体复制酶基因，所述多蛋白包含非结构蛋白（nsp）-15，所述复制酶基因编码所述nsp15并引起影响nsp15稳定性或活性的任何变化，包括突变和/或缺失。

2.根据权利要求1所述的冠状病毒，其中所述变化包括98位的苏氨酸至甲硫氨酸的氨基酸突变，或262位的催化组氨酸至丙氨酸的氨基酸突变。

3.根据权利要求1所述的冠状病毒，其中冠状病毒是野生型冠状病毒的突变。

4.根据权利要求3所述的冠状病毒，其中野生型冠状病毒是冠状病毒科病毒。

5.根据权利要求4所述的冠状病毒，其中冠状病毒科病毒选自由如下构成的组：严重急性呼吸综合征冠状病毒（SARS-CoV）、中东呼吸综合征冠状病毒（MERS-CoV）、人冠状病毒229E（HCoV-229E）、OC43（HCoV-OC43）、HKU1（HCoV-HKU1）和NL63（HCoV-NL63）、猫传染性腹膜炎病毒（FIPV）、犬冠状病毒（CCoV）、鸡传染性支气管炎病毒（IBV）、牛冠状病毒（BoCoV）和猪冠状病毒，所述猪冠状病毒包括传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪三角洲冠状病毒（PDCoV）、猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪呼吸道冠状病毒（PRCV）和猪血凝性脑脊髓炎冠状病毒（PHE-CoV）。

6.权利要求1的变体复制酶基因。

7.一种蛋白质，由权利要求6的变体复制酶基因编码。

8.一种质粒，包含权利要求6的变体复制酶基因。

9.一种疫苗，包含权利要求1的冠状病毒和载体。

10.一种用于预防个体疾病的方法，所述方法包括向个体施用根据权利要求9所述的疫苗。

11.根据权利要求10所述的方法，其中施用疫苗引起个体中I型干扰素的激活，相对于表达相应野生型复制酶基因的冠状病毒，其降低了冠状病毒的致病性。

12.一种预防个体疾病的方法，所述方法包括激活个体中的I型干扰素，其中I型干扰素的激活降低了冠状病毒的致病性。

13.一种制备疫苗的方法，所述方法包括：

修饰野生型冠状病毒以产生活的减毒冠状病毒，其包含变体复制酶基因，所述变体复制酶基因编码多蛋白并在非结构蛋白（nsp）-15中引起影响所述nsp15稳定性或活性的变化，包括突变和/或缺失；和

生产包含冠状病毒和载体的疫苗；

其中给个体施用所述疫苗引起个体中I型干扰素的活化，其降低了野生型冠状病毒的致病性。

14.根据权利要求13所述的方法，其中所述变化包括在位置98位的苏氨酸至甲硫氨酸的氨基酸突变或在262位的催化组氨酸至丙氨酸的氨基酸突变。

15.根据权利要求13所述的方法，其中野生型冠状病毒是冠状病毒科病毒。

16.根据权利要求13所述的方法，其中冠状病毒科病毒由以下构成：严重急性呼吸综合征冠状病毒（SARS-CoV）、中东呼吸综合征冠状病毒（MERS-CoV）、人冠状病毒229E（HCoV-229E）、OC43（HCoV-OC43）、HKU1（HCoV-HKU1）和NL63（HCoV-NL63）、猫传染性腹膜炎病毒（FIPV）、犬冠状病毒（CCoV）、鸡传染性支气管炎病毒（IBV）、牛冠状病毒（BoCoV）和猪冠状病毒，所述猪冠状病毒包括传染性胃肠炎病毒（TGEV）、猪三角洲冠状病毒（PDCoV）、猪流行性腹泻病毒（PEDV）、猪呼吸道冠状病毒（PRCV）和猪血凝性脑脊髓炎冠状病毒（PHE-CoV）。