[发明专利]用于对核酸进行测序的组合物和方法

权利要求书

1.一种多价转座酶试剂，其包含：

(a)水溶性多价核心；

(b)第一人工核酸，其包含含有TBS的第一末端；

(c)第二人工核酸，其包含含有TBS的第一末端；和

(d)第三人工核酸，其包含含有TBS的第一末端，

其中所述第一人工核酸、第二人工核酸和第三人工核酸被连接到所述可溶性多价核心。

2.权利要求1的试剂，其中所述第一人工核酸、第二人工核酸或第三人工核酸通过由偶联反应产生的共价键连接到所述可溶性多价核心。

3.权利要求2的试剂，其中所述偶联反应选自叠氮化物-炔烃Huisgen环加成、酰胺或硫代酰胺键形成、周环反应、Diels-Alder反应、磺酰胺键形成、醇或酚烷基化、缩合反应、二硫键形成和亲核取代。

4.权利要求3的试剂，其中所述偶联反应是叠氮化物-炔烃Huisgen环加成。

5.权利要求4的试剂，其中所述叠氮化物-炔烃Huisgen环加成是铜(I)催化的叠氮化物-炔烃环加成(CuAAC)或应变助催的叠氮化物-炔烃环加成(SPAAC)。

6.权利要求1的试剂，其中所述第一人工核酸、第二人工核酸或第三人工核酸被非共价连接到所述可溶性多价核心。

7.权利要求6的试剂，其中所述第一人工核酸、第二人工核酸或第三人工核酸通过亲和结合对连接到所述可溶性多价核心。

8.权利要求7的试剂，其中所述亲和结合对包含生物素-链亲和素、生物素-亲和素、配体-受体、抗原-抗体或抗原结合片段、或者Ig结合蛋白-Ig。

9.权利要求8的试剂，其中所述亲和结合对包含生物素-链亲和素或生物素-亲和素。

10.权利要求7-9中任一项的试剂，其中所述亲和结合对包含结合第二亲和组分的第一亲和组分，其中所述第一亲和组分被连接到所述可溶性多价核心，并且所述第二亲和组分被连接到所述第一人工核酸、第二人工核酸或第三人工核酸。

11.权利要求1-10中任一项的试剂，其还包含第一转座酶、第二转座酶和第三转座酶，所述第一转座酶、第二转座酶和第三转座酶结合到所述第一人工核酸的TBS、第二人工核酸的TBS和第三人工核酸的TBS。

12.权利要求1-11中任一项的试剂，其还包含第四人工核酸，所述第四人工核酸包含含有TBS的第一末端并被连接到所述可溶性多价核心。

13.权利要求12的试剂，其还包含第一转座酶、第二转座酶、第三转座酶和第四转座酶，所述第一转座酶、第二转座酶、第三转座酶和第四转座酶结合到所述第一人工核酸的TBS、第二人工核酸的TBS、第三人工核酸的TBS和第四人工核酸的TBS。

14.权利要求13的试剂，其中所述第一转座酶、第二转座酶、第三转座酶和第四转座酶中的至少两者形成寡聚化对。

15.权利要求14的试剂，其中所述第一转座酶和第二转座酶形成第一突触复合体，并且所述第三转座酶和第四转座酶形成第二突触复合体。

16.权利要求13的试剂，其还包含第五转座酶和第六转座酶，其中所述第一转座酶和第五转座酶被寡聚化以形成第一突触复合体，并且所述第二转座酶和第六转座酶被寡聚化以形成第二突触复合体，其中所述第五转座酶和第六转座酶被结合到接头核酸，所述接头核酸包含含有TBS的第一末端。