[发明专利]使用循环癌症相关巨噬细胞样细胞(CAML)预测患癌对象总生存期和无进展生存期的方法

说明书

公开了用于预测患有癌症的对象的总生存期(OS)和无进展生存期(PFS)的手段，其中，所述预测是基于来自对象的生物样本(例如，血液)中发现的循环癌症相关巨噬细胞样细胞(CAML)的数量和尺寸。

技术领域

本发明一般涉及生物标志物在血液和其他体液中预测患有癌症(例如实体瘤)的对象的总生存期和无进展生存期的用途。

背景技术

当肿瘤细胞脱离原发性实体瘤时，它们渗入血液或淋巴循环，最终离开血流并进入器官或组织形成转移。90％的癌症相关死亡是由转移过程引起的。最常见的转移部位是肺、肝、骨和脑。在循环中发现的肿瘤细胞称为循环肿瘤细胞(CTC)。许多研究出版物和临床试验显示，CTC具有临床实用性：(i)通过计算血流中的CTC来提供预后生存和癌症复发信息，和(ii)通过检查蛋白表达水平以及CTC中的基因突变和易位的发生来提供治疗信息。然而，即使在IV期癌症患者中，CTC与对象中癌症的发展和/或存在也不是一致相关。尽管CTC最常见于乳腺癌、前列腺癌和结肠直肠癌的IV期，但它们在相同癌症的早期阶段很少见。CTC在其他癌症中也很少见。

循环癌症相关巨噬细胞样细胞(CAML)是在患癌症对象的血液中发现的另一种癌症相关细胞类型。CAML与所有测试的实体肿瘤和癌症的所有阶段相关。CAML是多倍体并且尺寸非常大，尺寸为～25μm至～300μm。这些多倍体细胞可以是CD45(-)或CD45(+)并表达CD11c、CD14和CD31，这证实了它们作为髓系的起源。它们经常在吞噬CTC和细胞碎片的过程中被发现[1,7]。

与血液和其他体液中的生物标志物(例如CAML)的鉴定和表征相关的测定可用于提供预后信息。本发明涉及为临床医生和其他重要目标提供这样的工具。

发明内容

本发明涉及使用一类具有独特特征的细胞的方法，在患有实体瘤(包括恶性上皮肿瘤(carcinoma)、肉瘤、成神经细胞瘤和黑素瘤)的对象的血液中发现所述细胞。这些循环细胞称为“循环癌症相关巨噬细胞样细胞”(CAML)，已显示其与患有癌症的对象中实体瘤的存在相关。已经表征和描述了与CAML相关的五种形态[1,2]。已经通过使用精密微过滤器的微滤，在患有I期至IV期实体瘤的对象的外周血中一致地发现CAML。

与CAML相关的医学应用包括但不限于使用该细胞作为生物标志物以提供癌症的早期检测和癌症的诊断，特别是在癌症再现或复发的早期检测和诊断中，以及在确定癌症突变中。还通过本文呈现的数据显示CAML作为在疾病进展和患者生存期方面进行预测的生物标志物，具有临床实用性。

CAML可单独用作癌症标志物，或与循环肿瘤细胞(CTC)、上皮间充质转化细胞(EMT)、循环癌症相关血管内皮细胞(CAVE)、游离DNA(cfDNA)、循环肿瘤DNA(ctDNA)、甲基化DNA、蛋白质组学、代谢组学、脂质组学和其他生物标志物组合使用，以提供对患者疾病的更完整的了解。

更具体地，并且在第一实施例中，本发明涉及用于预测患有癌症的对象的总生存期(OS)和无进展生存期(PFS)的方法。这些方法包括确定来自患有癌症的第一对象的生物样本中的循环细胞的尺寸，并将结果与患有癌症的第二对象进行比较。预测具有较大尺寸细胞的对象的OS和PFS小于具有较小尺寸细胞的对象的OS和PFS。

在一个方面，该方法包括确定来自患有癌症的对象的生物样本中的循环细胞的尺寸，其中，当所述样本中的至少一个细胞的尺寸约为50μm或更大时，预测该对象的OS和PFS小于患有癌症且没有一个细胞的尺寸超过约50μm的对象。

在第二实施例中，本发明涉及用于预测患有癌症的对象的OS和PFS的方法。该方法包括确定来自患有癌症的对象的选定体积的生物样本中的循环细胞的比例，其中，当所述比例相当于每7.5mL生物样本约6个或更多个细胞时，预测该对象的OS和PFS小于患有癌症且比例相当于每7.5mL生物样本少于6个细胞的对象。