[发明专利]一种FMD抗原增强培养基及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种 FMD 抗原增强培养基，其特征在于，包括：L-丙氨酸 140mg/L、L-

谷氨酰胺 245mg/L、L-精氨酸盐酸盐 245mg/L、L-天冬氨酸 130mg/L、L-缬氨

酸 156mg/L、L-胱氨酸盐酸盐 62mg/L、L-组氨酸盐酸盐 100mg/L、L-赖氨酸

320mg/L、甘氨酸 70mg/L、硒酸钠 0.02mg/L、五水硫酸铜 0.0002mg/L、硫酸

亚铁 0.55mg/L、生物素 0.75mg/L、维生素 C 6mg/L、维生素 E 0.075mg/L、维

生素 D 0.75mg/L、氯化胆碱 0.775mg/L、D-泛酸钙 1.1mg/L、叶酸 4mg/L、烟

酰胺 6mg/L、盐酸吡哆醇 7mg/L、磷酸吡哆醛 0.2mg/L、核黄素 0.4mg/L、钴

胺素 2mg/L、盐酸硫胺素 0.25mg/L、肌醇 6mg/L、棉籽水解物 2000mg/L、酵

母超滤物 2000mg/L、大米水解物 1000mg/L、麦麸水解物 2000mg/L、D-葡萄

糖 4000mg/L、银耳多糖 150mg/ml、丙谷二肽 800mg/L、双甘肽 125mg/L、秋

水仙碱 0.23mg/L、硫辛酸 0.3mg/L、环庚三烯酚酮 5mg/L、酚红钠盐 10mg/L、

F-68 300mg/L、还原型谷胱甘肽 0.45mg/L、次黄嘌呤钠盐 0.26mg/L、8kd 小分

子肽 300mg/L 及丙酮酸钠 162mg/L；所述小分子肽从鱼胨蛋白、胶原蛋白、大

豆蛋白、棉籽蛋白、大米蛋白、麦麸蛋白中提取，可促进病毒在细胞中复制。

2.一种权利要求 1 所述的 FMD 抗原增强培养基的制备方法，其特征在于，

包括下述步骤：

1）按照体积比，称取原料，并将所述原料分类混合均匀，得到混合原料；

2）向容器中注入水至 900 ml，加入所述混合原料，轻微搅拌溶解；

3）向所述容器中加入碳酸氢钠，使其最终浓度为 2.5g/L，轻微搅拌使之溶解，

加注射用水至 1L，得到初始培养基；

4）将所述初始培养基用 0.2μm 滤膜正压过滤除菌，得到 FMD 抗原增强培养

基；

5）将所述 FMD 抗原增强培养基放置 2-8℃下密闭避光保存。

3.根据权利要求 2 所述的一种 FMD 抗原增强培养基的制备方法，其特征在

于，在所述步骤 3）之后、所述步骤 4）之前还包括：用 1mol/L 氢氧化钠溶液

或 1moL/L 盐酸溶液调节所述初始培养基的 pH 值至 7.5-7.8。

4.一种利用权利要求 1 所述的 FMD 抗原增强培养基制备疫苗的方法包括：

1）BHK-21 细胞的复苏；

2）扩增 BHK-21 细胞至 100L 反应器中；

3）细胞沉降后将原培养液上清去除，加入权利要求 1 所述的 FMD 抗原增强

培养基；

4）按照比例加入口蹄疫病毒，继续培养 10-20 h 后，待细胞病变 90%以上，

收获病毒液；

5）病毒灭活、纯化后制备得到灭活抗原。

6）灭活抗原与佐剂按照比例乳化制备口蹄疫疫苗制剂。