[发明专利]杭菊药材的UPLC特征图谱的构建方法、质量检测方法有效
| 申请号: | 201811572499.8 | 申请日: | 2018-12-21 |
| 公开(公告)号: | CN109374786B | 公开(公告)日: | 2021-10-29 |
| 发明(设计)人: | 魏梅;陈菊英;霍文杰;程学仁;丁青;杨晓东;刘晓霞;陈向东 | 申请(专利权)人: | 广东一方制药有限公司 |
| 主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02 |
| 代理公司: | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人: | 曾银凤 |
| 地址: | 528251 广东省*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 药材 uplc 特征 图谱 构建 方法 质量 检测 | ||
1.一种杭菊药材的UPLC特征图谱的构建方法,其特征在于,所述的构建方法包括:
供试品溶液制备:取杭菊药材,粉碎,加溶剂提取,过滤,所得滤液作为供试品溶液;
参照物溶液制备:取绿原酸、3,5-O-二咖啡酰奎宁酸、4,5-O-二咖啡酰奎宁酸、木犀草苷、蒙花苷,加溶剂溶解,所得溶液作为参照物溶液;
超高效液相色谱检测:吸取所述供试品溶液、参照物溶液,注入液相色谱仪,检测,获得杭菊药材的UPLC特征图谱,所述UPLC特征图谱中有11个特征共有峰,有效地表征杭菊药材、杭菊饮片和杭菊标准汤剂的质量;
所述超高效液相色谱检测采用的检测条件包括:
固定相:十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂的色谱柱;
流动相:流动相A为乙腈,流动相B为体积分数为0.8%~0.12%磷酸溶液,采用梯度洗脱;
洗脱梯度:0min~11min,8%→16%流动相A,92%→84%流动相B;11min~26min,16%→20%流动相A,84%→80%流动相B;26min~45min,20%→43%流动相A,80%→57%流动相B。
2.根据权利要求1所述的杭菊药材的UPLC特征图谱的构建方法,其特征在于,所述超高效液相色谱检测采用的检测条件包括:
固定相:Acquity UPLC HSS-T3色谱柱,规格为100mm×2.1mm,1.8µm;
流动相:流动相A为乙腈,流动相B为体积分数为0.1%磷酸溶液,采用梯度洗脱;
洗脱梯度:0min~11min,8%→16%流动相A,92%→84%流动相B;11min~26min,16%→20%流动相A,84%→80%流动相B;26min~45min,20%→43%流动相A,80%→57%流动相B。
3.根据权利要求1或2所述的杭菊药材的UPLC特征图谱的构建方法,其特征在于,所述超高效液相色谱检测采用的检测条件包括:柱温为20℃~43℃,流速为0.3mL/min~0.5mL/min,检测波长为220nm~380nm。
4.根据权利要求3所述的杭菊药材的UPLC特征图谱的构建方法,其特征在于,所述超高效液相色谱检测采用的检测条件包括:柱温为43℃,流速为0.3 mL·min-1,检测波长为348nm。
5.根据权利要求1或2所述的杭菊药材的UPLC特征图谱的构建方法,其特征在于,供试品溶液制备中,所述提取采用的溶剂为体积分数为0%~100%的甲醇溶液;所述提取的方式为加热回流或者超声;参照物溶液制备中,所述溶解采用的溶剂为体积分数为50%~100%的甲醇溶液。
6.根据权利要求1或2所述的杭菊药材的UPLC特征图谱的构建方法,其特征在于,所述的杭菊药材的UPLC特征图谱包含有11个特征峰,其中峰2、峰4、峰7、峰9、峰10应与相应参照物峰保留时间相同;与3,5-O-二咖啡酰基奎宁酸参照物相应的峰为S峰,计算各特征峰与S峰的相对保留时间,其相对保留时间应该在规定值的±10%范围之内;规定值为:峰1:0.17,峰3:0.33,峰5:0.84,峰6:0.95,峰8:1.05,峰11:1.80。
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