[发明专利]重组单纯疱疹病毒、试剂盒及其用途有效
| 申请号: | 201811556712.6 | 申请日: | 2018-12-19 |
| 公开(公告)号: | CN109679928B | 公开(公告)日: | 2019-12-10 |
| 发明(设计)人: | 赵长云;唐维;李秋霞 | 申请(专利权)人: | 重庆点检生物科技有限公司 |
| 主分类号: | C12N7/01 | 分类号: | C12N7/01;G01N33/574;G01N33/569;C12R1/93 |
| 代理公司: | 11105 北京市柳沈律师事务所 | 代理人: | 张文辉 |
| 地址: | 401121 重庆*** | 国省代码: | 重庆;50 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 重组单纯疱疹病毒 前列腺癌 单纯疱疹病毒 启动子 试剂盒 端粒酶逆转录酶启动子 前列腺特异性膜抗原 感染细胞蛋白 前列腺癌细胞 病毒基因组 蛋白质基因 高灵敏度 体外诊断 表达盒 基因组 可检测 灵敏度 基因 检测 捕获 替换 | ||
1.重组单纯疱疹病毒,所述重组单纯疱疹病毒是含有感染细胞蛋白4 (infected cellprotein 4, ICP 4)基因的单纯疱疹病毒基因组中的ICP4基因启动子替换为人端粒酶逆转录酶启动子hTERTp的单纯疱疹病毒,
其中所述重组单纯疱疹病毒的ICP 47基因是删除的,并且受前列腺特异性膜抗原启动子PSMAp控制的产生可检测光的蛋白质基因的表达盒插入删除的ICP 47基因位置。
2.根据权利要求1所述的重组单纯疱疹病毒,其中所述重组单纯疱疹病毒的ICP 34.5基因是删除的。
3.根据权利要求1所述的重组单纯疱疹病毒,其中所述产生可检测光的蛋白质是绿色荧光蛋白、黄色荧光蛋白、橙色荧光蛋白或青色荧光蛋白。
4.根据权利要求1所述的重组单纯疱疹病毒,其中所述前列腺特异性膜抗原启动子包含以SEQ ID NO.2所示的序列。
5.根据权利要求1所述的重组单纯疱疹病毒,其中所述单纯疱疹病毒是17+单纯疱疹病毒毒株。
6.根据权利要求5所述的重组单纯疱疹病毒,其中所述17+单纯疱疹病毒毒株是以保藏编号CGMCC NO. 6397保藏于中国微生物菌种保藏委员会普通微生物中心的重组单纯疱疹病毒。
7.根据权利要求5或6所述的重组单纯疱疹病毒,其中ICP 4基因中与17+单纯疱疹病毒毒株的127235-131131对应的位置是删除的,并且人端粒酶逆转录酶启动子hTERTp插入相应的位置中;
且ICP 47基因中与17+单纯疱疹病毒毒株的145316-145582对应的位置是删除的,并且所述表达盒插入删除的位置中。
8.根据权利要求5或6所述的重组单纯疱疹病毒,其中ICP 34.5基因中与17+单纯疱疹病毒毒株的513-1259和/或125115-125861对应的位置是删除的。
9.用于检测受试者中的循环前列腺癌细胞的试剂盒,其包含根据权利要求1-8中任一项所述的重组单纯疱疹病毒、以及检测白细胞表面抗原的试剂和检测循环前列腺癌细胞表面抗原的试剂。
10.根据权利要求9所述的试剂盒,所述试剂盒包含红细胞裂解液、洗涤液和转染试剂。
11.根据权利要求9或10所述的试剂盒,其中所述检测白细胞表面抗原的试剂和/或所述检测循环前列腺癌细胞表面抗原的试剂是标记的。
12.根据权利要求9或10所述的试剂盒,其中所述检测白细胞表面抗原的试剂和/或所述检测循环前列腺癌细胞表面抗原的试剂是抗体。
13.根据权利要求9或10所述的试剂盒,其中用不同的可检测标记物标记所述检测白细胞表面抗原的试剂和/或所述检测循环前列腺癌细胞表面抗原的试剂。
14.根据权利要求9或10所述的试剂盒,其中所述可检测标记物选自PE、APC、PE-CY5、PerCP-CY5.5、FITC、PerCP、CY-7、APC-CY7、eFluor/Super Bright系列荧光染料和AlexaFluor系列荧光染料。
15.根据权利要求14所述的试剂盒,其中所述白细胞表面抗原是CD45分子和/或所述循环前列腺癌细胞表面抗原是PSMA。
16.试剂在制备用于检测受试者中的循环前列腺癌细胞的试剂盒中的用途,其中所述试剂是根据权利要求1-8中任一项所述的重组单纯疱疹病毒或者包含根据权利要求1-8中任一项所述的重组单纯疱疹病毒、检测白细胞表面抗原的试剂和检测循环前列腺癌细胞表面抗原的试剂。
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