[发明专利]一种淀粉蔗糖酶突变体及其制备方法与应用有效
| 申请号： | 201811547297.8 | 申请日： | 2018-12-18 |
| 公开（公告）号： | CN109576240B | 公开（公告）日： | 2020-08-04 |
| 发明（设计）人： | 吴敬;吴丹;宿玲恰;赵雅琪 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C12N9/10 | 分类号： | C12N9/10;C12N15/54;C12N15/70;C12P19/14;C12P19/12 |
| 代理公司： | 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 | 代理人： | 张勇 |
| 地址： | 214000 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 淀粉 蔗糖 突变体 及其 制备 方法 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种淀粉蔗糖酶突变体，其特征在于，所述淀粉蔗糖酶突变体的氨基酸序列如SEQID NO.2所示。
2.编码权利要求1所述的一种淀粉蔗糖酶突变体的基因。
3.一种制备权利要求1所述淀粉蔗糖酶突变体的方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)在淀粉蔗糖酶氨基酸序列的基础上确定突变位点；设计定点突变的突变引物，以携带淀粉蔗糖酶基因的载体为模板进行定点突变；构建含突变体的质粒载体；
(2)将突变体质粒转化进宿主细胞；
(3)挑选阳性克隆进行发酵培养，制备酶液，获得淀粉蔗糖酶突变体。
4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述质粒载体为pUC系列，pET系列，或pGEX中的任意一种；所述宿主细胞为细菌或真菌细胞；所述的细菌为革兰氏阴性菌或革兰氏阳性菌。
5.一种生产松二糖的方法，其特征在于，所述方法是以蔗糖为底物，以权利要求1所述的一种淀粉蔗糖酶突变体为催化剂，将蔗糖转化为松二糖。
6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述蔗糖的浓度为180～220g/L，所述淀粉蔗糖酶突变体的浓度为0.2～0.5U/mL。
7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述转化是在30～40℃条件下进行45～50h。
8.权利要求1所述的一种淀粉蔗糖酶突变体在制备含松二糖的产品方面的应用。
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