[发明专利]一种悬浮培养白及细胞的方法有效
| 申请号： | 201811481695.4 | 申请日： | 2018-12-05 |
| 公开（公告）号： | CN109496860B | 公开（公告）日： | 2021-08-13 |
| 发明（设计）人： | 徐德林;张社波;潘胤池;李林;冷昌尉;沈访;上官艳妮;刘厚伯 | 申请（专利权）人： | 遵义医科大学 |
| 主分类号： | A01H4/00 | 分类号： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 重庆强大凯创专利代理事务所(普通合伙) 50217 | 代理人： | 张显琴 |
| 地址： | 563000 *** | 国省代码： | 贵州;52 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 悬浮 培养 白及 细胞 方法 | ||
1.一种悬浮培养白及细胞的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一、取成熟的白及蒴果进行无菌消毒，并获取白及种子；
步骤二、诱导白及种子萌发获取愈伤组织：将白及种子放于无菌的诱导培养基中在黑暗条件下培养，培养温度为25±2℃，培养时间为60～90天；诱导培养基为：MS+6-苄氨基嘌呤1.5±0.5mg/L+2,4-二氯苯氧乙酸2.5±0.5mg/L+30±20g/L蔗糖+7±1g/L琼脂，诱导培养基的pH为5.9±0.1；
步骤三、接种：将步骤二培养获取的愈伤组织接种到继代培养基中在黑暗条件下培养，继代培养基为：MS+6-苄氨基嘌呤1.5±0.5mg/L+2,4-二氯苯氧乙酸2.5±0.5mg/L+30±20g/L蔗糖+7±1g/L琼脂，继代培养基的pH为5.9±0.1；接种培养的温度为25±2℃，时间为25～45天后得到外植体；
步骤四、悬浮培养：将步骤三得到的外植体接种到悬浮培养基中进行悬浮培养，悬浮培养基为MS+6-苄氨基嘌呤1.5±0.45mg/L+2,4-二氯苯氧乙酸2.5±0.5mg/L+30±20g/L蔗糖；悬浮培养基的pH为5.9±0.1；外植体的接种量与培养基的体积比例为1/80～1/20g/mL；接种后在转速为110±10r/min、温度为25±2℃的黑暗条件下进行振荡悬浮培养，悬浮培养时间为40～50天。
2.根据权利要求1所述的悬浮培养白及细胞的方法，其特征在于：步骤一中，白及蒴果的无菌消毒方法为：先将蒴果应用酒精消毒，然后无菌水润洗，再然后用氯化汞溶液进行消毒，最后再用无菌水润洗数次，用无菌吸水纸吸干蒴果表面水分。
3.根据权利要求2所述的悬浮培养白及细胞的方法，其特征在于：步骤四中悬浮培养45天。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于遵义医科大学，未经遵义医科大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201811481695.4/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
