[发明专利]一种抗HIV药物关键中间体β-胸苷的检测方法

权利要求书

1.一种抗HIV药物关键中间体β-胸苷的检测方法，其特征在于：采用高效液相色谱法对β-胸苷的含量以及有关物质进行检测，包括如下步骤：

(1)供试品溶液的制备：取β-胸苷产品成品，用流动相溶解并稀释成每1ml中约含1mgβ-胸苷的溶液，作为供试品溶液(需临用新制)；

(2)对照品溶液的制备：精密量取1mlβ-胸苷对照品，置100ml量瓶中，用流动相稀释至100ml刻度，摇匀，作为对照品溶液；

(3)采用高效液相色谱法对β-胸苷进行分析检测：

①、检测条件：所述高效液相色谱法所采用的检测器为紫外检测器，其色谱条件如下：色谱柱：C18柱或其他等效的色谱柱；流速：0.8ml/min-1.2ml/min；色谱柱温度：25℃-35℃；检测波长：260nm-270nm；

②、检测方法：检测时，取对照品溶液10μl注入液相色谱仪，调节检测灵敏度，使主成分色谱峰的峰高约为满量程的20％；再精密量取供试品溶液与对照品溶液各10μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图至主成分峰保留时间的2.5倍。

2.根据权利要求1所述一种抗HIV药物关键中间体β-胸苷的检测方法，其特征在于：所述供试品溶液色谱图中的杂质峰，单个杂质峰面积不大于对照溶液主峰面积的0.5倍(0.5％)，各杂质峰面积的和不大于对照溶液主峰面积的2倍(2.0％)。

3.根据权利要求1所述一种抗HIV药物关键中间体β-胸苷的检测方法，其特征在于：所述β-胸苷的检测方法，具体包括如下步骤：

(1)样品制备：取β-胸苷产品成品50ml，18000r/min离心10分钟，取上清液，量取Xml置于容量瓶中，加水溶解并稀释至100倍体积，摇匀，0.45μm微孔滤膜过滤，再取过滤液Yml移至量瓶中，加水稀释至10倍体积，摇匀，0.45μm微孔滤膜过滤，得待测液；

(2)采用高效液相色谱进行分析检测，标准工作液设有不包含零点的六个浓度梯度，以β-胸苷量为横坐标，峰面积积分值为纵坐标，绘制标准曲线，按外标法计算待测液中β-胸苷的含量，即得β-胸苷产品成品中β- 胸苷的含量。

4.根据权利要求3所述一种抗HIV药物关键中间体β-胸苷的检测方法，其特征在于：所述步骤(3)中，色谱柱为4.6mm×250mm、5μm的Shim-pack ODS C18柱；流速为1ml/min；色谱柱温度：30℃；检测波长为265nm。

5.根据权利要求1所述一种抗HIV药物关键中间体β-胸苷的检测方法，其特征在于：所述流动相为甲醇含量为92％的甲醇水溶液。