[发明专利]一种迭鞘石斛酸性多糖及其制备方法与应用

说明书

本发明公开了一种迭鞘石斛酸性多糖及其制备方法与应用，该方法是以迭鞘石斛茎为材料，经烘干粉碎获得迭鞘石斛干粉，采用碱水提醇沉的方法提取，经脱脂、碱水浸提、醇沉、去蛋白、除小分子、冷冻干燥获得迭鞘石斛酸性多糖。所得多糖为α‑构型，分子量为Mw=5.78×104 Da，其中糖醛酸含量为292.2 mg/g。该多糖具有显著的免疫增强活性，可用于提高免疫药物中应用。

技术领域

本发明属于中药提取技术领域，具体地说，涉及一种迭鞘石斛酸性多糖及其制备方法与应用。

背景技术

石斛（Dendrobium）之名最早见于《山海经》，药用始载于《神农本草经》，被列为上品，是常用名贵中药材。其药用历史悠久，具有滋阴清热、生津益胃、润肺止咳等功能，被誉为中国九大仙草之一。我国石斛资源丰富，共有石斛属植物76种，2变种。被称为中药宝库的四川也是石斛的主产地之一，共有石斛属植物11种，其中迭鞘石斛产量尤为丰富。研究发现，石斛属植物中含有丰富的多糖，并且大都具有较强生物活性，如抗氧化、抗衰老、降血糖、抗肿瘤和免疫调节等。其中石斛属植物多糖的抗免疫调节活性备受关注，但主要集中在石斛的中性多糖，而科学发现，植物酸性多糖通常具有更强的生物活性，而在多糖发挥生物活性时，其结构上的糖醛酸等酸性基团起着至关重要的作用。

目前对于迭鞘石斛植物多糖作用的物质基础研究较少，酸性多糖的提取、分离纯化及多糖上的酸性基团作用基础研究缺乏，未见相关的文献或专利的报道。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种迭鞘石斛酸性多糖及其制备方法与应用。

为了解决上述技术问题，本发明公开了一种迭鞘石斛酸性多糖的制备方法，包括以下步骤：

步骤1、取迭鞘石斛粉末于圆底烧瓶中，加入石油醚后在水浴锅中微沸回流提取，过滤，弃滤液，烘干至恒重以去除脂溶性物质；药渣继续用乙醇微沸回流提取，过滤，弃滤液；干燥后的药渣再移入烧杯中加入氢氧化钠，室温下磁力搅拌浸提，收集滤液，重复提取一次，合并两次滤液后用盐酸调节至中性，旋转蒸发，用Sevag试剂去蛋白，重复4次，收集合并上清液旋转蒸发；

步骤2、上清液于磁力搅拌器上搅拌，用分液漏斗向其中缓慢加入无水乙醇，离心弃沉淀；滤液中继续加无水乙醇，收集沉淀；依次用丙酮、乙酸乙酯、无水乙醇洗涤沉淀后离心，于4℃冰箱内保存备用；

步骤3、将上述样品用去离子水溶解后，装入透析袋中于烧杯中，在磁力搅拌的条件下用去离子水透析；收集透析后样品溶液冷冻干燥即得迭鞘石斛酸性多糖。

可选地，所述步骤1中的石油醚的沸点为60-90℃，迭鞘石斛粉末与石油醚的质量体积比（g/ml）为1:4-3:4；回流提取时间为0.5h-1.5h；所述乙醇的体积百分含量为80%。

可选地，所述步骤1中的氢氧化钠与迭鞘石斛粉末的摩尔质量比（mmol/g）为1:1-5:1；磁力搅拌浸提时间为4-8h。

可选地，所述步骤1中的第一次旋转蒸发的物质与迭鞘石斛粉末体积质量比为3:2-7:2，Sevag试剂为体积比1:4的正丁醇和三氯甲烷；Sevag试剂与迭鞘石斛粉末体积质量比为3:2-7:2，第二次旋转蒸发的上清液与迭鞘石斛粉末的体积质量比（mL/g）为5:2-10:2。

可选地，所述步骤2中的第一次无水乙醇的添加量为上清液与无水乙醇总体积的40%；第二次无水乙醇的添加量为滤液与无水乙醇总体积的60%。

可选地，所述步骤3中的透析时间为64h-80h，8h换一次水。

本发明还公开了一种上述的制备方法制备得到的迭鞘石斛酸性多糖。

可选地，为α-构型，分子量为Mw=5.78×104 Da，其中糖醛酸含量为292.2 mg/g。